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研究目的本研究通过槐定碱(Sophoridine,SR)及ESI-09作用于胃癌MKN45细胞,分别观察单药和联合用药对胃癌细胞的调节作用以及对胃癌细胞凋亡的干预作用,揭示槐定碱和ESI-09对胃癌增殖凋亡的影响以及槐定碱联合ESI-09抗胃癌的分子机制。研究方法利用CCK8和结晶紫实验检测槐定碱和ESI-09对MKN45细胞增殖活力的影响;通过划痕实验检测槐定碱和ESI-09对MKN45细胞迁移能力的影响;通过Western Blot检测槐定碱联合 ESI-09 对 MKN45 细胞 p53、NF-kB p65、Nrf2、E-cadherin、N-cadherin 蛋白水平的影响;通过流式细胞术法检测槐定碱联合ESI-09对MKN45细胞凋亡的影响。研究结果1.槐定碱高中低剂量组和ESI-09高中低剂量组都能够显著抑制MKN45细胞的增殖,并呈现出一定的浓度依赖性;槐定碱高中低剂量分别联合ESI-09低剂量以及槐定碱高剂量联合ESI-09中剂量这4组的联合用药也都表现出了对MKN45细胞的抑制作用,其中槐定碱高剂量联合ESI-09中剂量组的抑制作用最强。2.划痕实验中,槐定碱高中低剂量组和ESI-09高中低剂量组都能够显著抑制MKN45细胞的迁移,呈现出浓度依赖性;槐定碱高中低剂量分别联合ESI-09低剂量以及槐定碱高剂量联合ESI-09中剂量这4组的联合用药也都表现出了对MKN45细胞的抑制作用,其中槐定碱高剂量联合ESI-09中剂量组的抑制作用最强。3.选取抑制增殖和迁移作用最强的槐定碱高剂量联合ESI-09中剂量组以及相对应浓度的两味单药,通过Western Blot实验结果显示,槐定碱可以上调p53的蛋白水平;槐定碱、ESI-09和联合用药组可以下调p65、Nrf2、N-cadherin的蛋白水平,同时提高E-cadherin蛋白表达。4.选取抑制增殖和迁移作用最强的槐定碱高剂量联合ESI-09中剂量组以及相对应浓度的两味单药,通过流式细胞术结果显示,槐定碱、ESI-09和联合用药组可以促进MKN45细胞的凋亡。结论1.不同浓度的槐定碱、ESI-09和联合用药可以抑制胃癌MKN45细胞的增殖,有一定的浓度依赖性,其中联合用药抑制作用最强。2.不同浓度槐定碱、ESI-09和联合用药能够抑制胃癌MKN45细胞的迁移能力,呈现出浓度依赖性,其中联合用药抑制作用最强。3.槐定碱联合ESI-09可以通过下调p65、Nrf2的蛋白表达来抑制EMT的发生,从而发挥抗肿瘤作用。4.槐定碱联合ESI-09提高了 MKN45细胞的凋亡率,发挥了抗肿瘤作用。