清一片抗乙肝病毒作用的实验研究

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目的:本文旨在通过观察清一片抗鸭乙肝病毒(DHBV)、保肝作用及对免疫低下小鼠免疫功能的影响研究清一片抗乙肝病毒(HBV)的作用。  方法:1.采用经腿胫静脉注射南京麻鸭DHBV-DNA阳性鸭血清的1日龄北京鸭感染DHBV模型,感染7天后灌胃给药,给予清一片50、100、200mg/kg剂量,每天2次,连续10天,分别在给药前(T0),给药后第5天(T5)和第10天(T10)及停药后第3天(P3)取血分离血清,用酶标仪测定血清DHBV-DNA水平,观察清一片对DHBV感染鸭血清DHBV-DNA的影响。2.分别采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)、D-半乳糖胺(D-GalN)及尾静脉注射卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)致急性肝损伤小鼠的模型,灌胃给药,给予清一片50、100、200mg/kg剂量,每天1次,连续14天,以血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝组织HE染色病理切片检查为评价指标观察清一片保肝作用。3.采用皮下注射环磷酰胺(CY)致免疫低下小鼠的模型,灌胃给药,给予清一片50、100、200mg/kg剂量,每天1次,连续14天,以小鼠血清溶血素含量(HCIgM)、刀豆蛋白(ConA)诱导脾淋巴细胞增殖、廓清指数K值和校正系数a值为指标评价清一片对免疫低下小鼠免疫功能的影响。  结果:1.清一片100、200mg/kg剂量在T10与P3对DHBV感染鸭血清DHBV-DNA水平升高有明显降低作用,且无停药后反跳现象。2.清一片50、100、200mg/kg剂量对CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT的升高具有明显降低作用,与模型组比较有显著性差异(P?0.05),但对血清AST的升高无明显降低作用,与模型组比较无显著性差异(P>0.05),病理切片检查,50、100、200mg/kg剂量能明显减轻炎细胞浸润及肝细胞坏死病变,病理评分与模型组比较有显著性差异(P?0.05~0.01);清一片50、100、200mg/kg剂量对D-GalN致急性肝损伤小鼠血清ALT的升高具有明显降低作用,与模型组比较有显著性差异(P?0.05~0.01),病理切片检查,100、200mg/kg剂量能明显减轻炎细胞浸润及肝细胞坏死病变,病理评分与模型组比较有显著性差异(P?0.05~0.01);清一片50、100、200mg/kg剂量对BCG+LPS致免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST的升高无明显降低作用,与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。3.清一片50、100、200mg/kg剂量均能明显升高CY致免疫低下小鼠血清溶血素的含量,与模型组比较有显著性差异(P?0.05~0.01);清一片100、200mg/kg剂量的脾淋巴细胞增殖的OD值明显高于模型组(P<0.01),提示清一片能促进CY致免疫低下小鼠脾淋巴细胞的增殖;清一片50、100、200mg/kg剂量对CY致免疫低下小鼠廓清指数K和校正系数a值的降低无明显影响,与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。  结论:1.清一片能明显降低 DHBV感染鸭血清的DHBV-DNA水平,具有抗 DHBV作用,且无停药后反跳现象。2.清一片能明显降低CCl4、D-GalN致急性肝损伤小鼠血清 ALT的升高,并有效改善病理损伤,具有保肝作用。3.清一片能明显升高 CY致免疫低下小鼠血清溶血素的含量及促进脾淋巴细胞的增殖,具有提高免疫低下小鼠免疫功能的作用。综上表明清一片具有抗 DHBV、保肝及提高免疫低下小鼠免疫功能的作用,提示清一片具有明显的抗HBV作用。
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