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[目的]探寻Ⅰ-Ⅲ期胃癌根治术后患者临床病理特征、术后治疗特点与生存预后的关系;分析Ⅲ期胃癌根治术后患者突变基因、TMB与预后的关系;分析PD-1/PD-L1在Ⅰ-Ⅲ期胃癌根治术后患者的表达水平,并探寻其与预后的关系。试寻找能够有效预测胃癌复发转移风险及生存预后的分子标志物。[方法]回顾性分析2009年1月至2014年12月在我院行胃癌根治术且临床及随访资料完整的Ⅰ-Ⅲ期病例,统计分析其临床病理特征、术后治疗特点与生存预后的关系;通过NGS测序分析38例Ⅲ期胃癌根治术后患者的突变基因、TMB和微卫星不稳定情况;收集Ⅰ-Ⅲ期胃癌术后患者肿瘤及癌旁组织病理切片,利用免疫组化染色技术检测PD-1和PD-L1在胃癌组织中的表达水平;采用SPSS 25.0软件包统计分析上述各因素与临床病理特征及生存预后之间的关系。应用统计软件包R、GraphPad Prism、ClusterProfiler进行基因分析及绘图。[结果]1、全部334例胃癌术后患者,中位随访时间为83.4月,截止本次随访终点2018年9月1日,疾病复发或转移191例(57.2%),死亡178例(53.5%),mDFS为34.8月,mOS为61.0月,5年无疾病生存率和总生存率为45.0%和50.1%。多因素生存分析显示:肿瘤大小、肿瘤位置、含印戒成分、癌结节、TNM分期是影响mDFS的独立预后因素,肿瘤大小、肿瘤位置、含印戒成分、癌结节、TNM分期是影响mOS的独立预后因素。2、对38例Ⅲ期胃癌术后患者进行NGS测序分析结果显示:共发现了63个和肿瘤相关的基因发生突变,高频突变基因前5位为TP53(26/38)、ARID1A(9/38)、CCNE1(9/38)、KRAS(5/38)、PTEN(4/38)。上述基因不论在长、短生存组还是早、晚复发组中,基因突变频率差异均无统计学意义(P>0.05)。通过GO基因功能与KEGG通路富集分析,发现突变基因显著富集于PI3K-Akt signaling pathway、MAPK signaling pathway这两条通路中。单因素分析显示:TMB>10Muts/Mb的患者与TMB<10Muts/Mb的患者相比,mOS(未达到VS 29.42月,P=0.038)明显延长。3、PD-L1在胃癌组织中的阳性表达率为44.0%(147/334),明显高于癌旁组织的0%(0/20)。PD-L1阴性表达组的mDFS和mOS较阳性表达组患者明显延长,差异具有统计学意义(mDFS:44.47月 VS 22.31 月,P=0.039;mOS:84.14月 VS 40.12月,P=0.006)。多因素生存分析显示PD-L1表达水平是影响胃癌术后患者mDFS和mOS的独立预后因素。4、PD-1在胃癌组织中的阳性表达率为37.7%(126/334),明显高于癌旁组织的5%(1/20)。PD-1的表达水平与mDFS和mOS均无关。5、PD-L1、PD-1在胃癌组织中的表达无明显相关性。6、PD-L1表达与TMB无明显相关性。[结论]1.Ⅲ期胃癌中高频突变基因为TP53、ARID1A、CCNE1、KRAS、PTEN。上述基因不论在长、短生存组还是早、晚复发组中,基因突变频率差异均无统计学意义。突变基因显著富集于PI3K-Akt signaling pathway、MAPK signaling pathway这两条通路中。TMB≥10Muts/Mb的患者mOS明显延长。2.肿瘤大小、肿瘤位置、含印戒细胞、癌结节、TNM分期、PD-L1是影响胃癌术后患者mDFS的独立预后因素,肿瘤大小、肿瘤位置、含印戒细胞、癌结节、TNM分期、PD-L 1是影响胃癌术后患者mOS的独立预后因素。