合肥地区乙型肝炎病毒基因型分布与Th1/Th2免疫应答及不同临床类型相关性

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目的研究合肥地区不同类型乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV基因型分布情况,血清中IFN-γ、IL-6、IL-10含量及其与临床指征的相关性。方法收集合肥地区正常人血清30份,HBV感染者血清192例,其中无症状携带者38例,慢性乙型肝炎109例,肝硬化25例,肝细胞癌20例,分别提取HBV感染者血清中HBV基因组DNA,应用巢式PCR对进行HBV基因型及亚型分型,通过对PCR产物电泳及其酶切后电泳片段大小确定其基因型及其基因亚型,分析其与临床症状之间的关系。ELISA定性检测HBV感染者血清中HBe Ag,荧光定量PCR检测血清中HBV DNA含量,判断HBe Ag阳性和阴性以及血清HBV DNA含量与HBV基因型的相关性。ELISA检测上述30份正常人血清和192份HBV感染者血清中IFN-γ、IL-6、IL-10含量,分析血清IFN-γ、IL-6、IL-10含量与HBV感染者临床症状以及HBV基因型的相关性。结果192份HBV感染者血清中,82例(42.7%)B型,其中57例(69.5%)为Ba亚型,8例(9.8%)为Bj亚型,17例(20.7%)为非Ba/Bj亚型;99例(51.6%)为C型,其中8例(8.1%)为C1亚型,56例(56.6%)为C2亚型,35例(35.4%)为非C1/C2亚型;11例(5.7%)为B型与C型混合感染,其中6例(54.5%)为Ba与C2亚型混合感染,2例(18.2%)为Bj与C2型混合感染,2例(18.2%)为Ba与非C1/C2亚型混合感染,1例(9.1%)为非Ba/Bj亚型与C2亚型混合感染,未检测到其他基因型及亚型。在上述不同类型乙型肝炎病毒感染者中,B型、C型、B与C型混合感染及亚型分布差异有统计学意义,在肝硬化和肝细胞癌患者中C型所占比例较高(分别为72.0%和85.0%),无症状携带者中B型所占比例较高(81.6%)。但不同性别患者中,HBV基因型分布无差异。在HBe Ag阳性和阴性感染者中,HBV基因型分布差异也有统计学意义,HBe Ag阳性组C基因型比例明显高于HBe Ag阴性感染组(p<0.05),但HBe Ag阴性组的B型及B与C型混合感染型的比例则高于HBe Ag阳性组(p<0.05)。不同基因型HBV DNA复制水平的比较发现,C基因型HBV DNA定量显著高于B基因型,差异均有统计学意义。ELISA检测提示,正常人血清IFN-γ、IL-6、IL-10含量均明显高于HBV感染者;而HBV感染者中,IFN-γ和IL-10在慢性乙型肝炎患者,肝细胞癌患者以及肝硬化患者血清中含量呈现逐渐上升趋势,而IL-6在HBV感染者血清中的含量没有明显的差异。不同基因型HBV感染者血清IFN-γ、IL-6、IL-10水平比较发现,IFN-γ水平B基因高于C基因型,其差异有统计学意义(p<0.05);而B+C基因型与B基因型和C基因型差异无显著性(p>0.05)。结论合肥市HBV感染者中,以B和C基因型占优势,C基因型可能与肝硬化和肝细胞癌的发生有关;B基因型常见于HBe Ag阴性感染者,而C基因型多见于HBe Ag阳性感染者;慢性乙型肝炎患者,肝细胞癌患者以及肝硬化患者血清中IFN-γ和IL-10含量呈现逐渐上升;HBV感染者血清IFN-γ水平B基因高于C基因型,血清IL-6和IL-10水平,在各基因型中无显著性差异。
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