血红素加氧酶-1在硝普钠减轻大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

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目的:研究外源性一氧化氮供体——硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)气管内滴注致大鼠急性肺损伤时肺组织血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响,从诱导机体内源性抗氧化保护系统的角度,初步探讨硝普钠的肺保护机制。 方法:采用内毒素气管内滴入建立大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,32只清洁级Wistar大鼠,体重190~210g,雌雄不限,随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、内毒素组(LPS组)、HO-1诱导剂hemin预处理组(HM组)、硝普钠治疗组(SNP组)。7%水合氯醛5m1·kg-1腹腔注射麻醉,LPS组、HM组和SNP组大鼠分别暴露气管行环甲膜穿刺,气管内缓慢滴注生理盐水配制的LPS溶液300μl(LPS750μg·kg-1),S组气管内滴注同等体积的生理盐水,余同实验组。HM组:在给LPS前12h腹腔内注射hemin(40μmol·kg-1);SNP组:将LPS(750μg·kg-1)与SNP(25μg·kg-1)溶于300μl生理盐水中同时气管内滴注。22号穿刺针行右颈动脉穿刺分别于术前和术后8h取血1ml立即进行动脉血气分析;8h后颈动脉放血处死,收集左肺支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)离心(3000r·min-1)10min,取上清液—70℃保存备用;取右肺上叶测量湿/干重比;取右肺中叶100mg(湿重)制备组织匀浆;取右肺下叶0.5cmx0.5cm组织,10%甲醛固定,石蜡包埋,制作石蜡切片。用免疫组织化学SABC法检测肺组织HO-1、iNOS表达和分布,并用HIPAS-2000型计算机图象分析软件对HO-1和iNOS表达进行半定量分析。检测颈动脉血氧分压(PaO2)、肺湿/干重比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、肺组织丙二醛(MDA)含量,并观察光镜下肺组织病理变化。 结果:(1)HO-1的蛋白表达:与S组HO-1蛋白表达OD值(0.085±0.016)比较,LPS组HO-1蛋白表达为(0.175±0.022),明显增强(P<0.01);hemin予处理后HO-1蛋白表达OD值(0.217±0.029)以及硝普钠治疗后HO-1蛋白表达OD值(0.201±0.016)分别增高LPS组的24%和15%(P<0.01,P<0.05),是S组的2.6倍和2.4倍(P<0.01)。(2)iNOS的蛋白表达:LPS组iNOS蛋白表达OD值为(0.183±0.025),较S组(0.088±0.014)增强1.1倍(P<0.01);HM组iNOS蛋白
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