基于磷酸钙纳米颗粒的pH敏感药物载体的构建与初步应用

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磷酸钙(CaP)纳米粒子具有pH敏感、生物相容性好的优点,常用做药物/基因载体。然而按照现有制备方法得到的磷酸钙纳米颗粒具有分散性差、易团聚等缺陷。因此,本文针对上述缺陷,采用微乳液法,探索制备磷酸钙过程中不同因素的影响,并采用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)及BSA-PLGA对磷酸钙纳米颗粒进行了改性,具体研究内容如下:(1) CaP纳米颗粒的制备与表征:采用微乳液法,通过调节不同水油比,反应时间以及反应温度来探索制备磷酸钙的条件,并采用FTIR,EDX,XRD等一系列方法对材料进行了表征。结果表明:当环己烷:己醇:Trition体积比为8:4:6,反应物浓度为250mM,反应时间为30min时,所得到的磷酸钙纳米颗粒分散较好,粒径在60~90nm,电位在-16~-8mv;(2) CaP纳米颗粒的pH敏感实验:在不同pH条件下离心进行宏观观察,同时采用包裹阿霉素的纳米载体在不同pH条件下进行体外药物释放,结果表明:当外界环境pH为7.4时,药物释放量约48%,在pH为5.0的环境下,药物释放量达到了90%以上,证明了材料的pH敏感性;(3) PLGA对CaP纳米颗粒的改性:通过乳化方法采用PLGA对CaP纳米颗粒进行改性,并采用FTIR,TEM等手段对其进行一系列的表征,结果表明:成功合成了CaP/PLGA的复合纳米颗粒,其粒径在200nm左右,并在水中均匀分散,解决了CaP纳米颗粒在水中不稳定、易聚集的缺陷;(4) CaP以及CaP/PLGA复合纳米颗粒的细胞毒性以及细胞摄取实验:采用Hela细胞和U251细胞对材料毒性进行试验,MTT比色法表明:CaP以及CaP/PLGA均具有较低的细胞毒性;采用Hela细胞与包载阿霉素的CaP以及CaP/PLGA分别进行共培养,结果表明:纳米载体可以进入细胞并且释放其包载的阿霉素。(5)双亲性高分子BSA-PLGA对CaP纳米颗粒的改性:通过乳化的方法合成CaP与BSA-PLGA的复合纳米颗粒,并通过TEM对其形貌、粒径进行观察。结果表明:采用BSA-PLGA改性后的CaP纳米颗粒粒径在100nm左右,且分散均匀。由以上结果可知:通过微乳液方法制备了分散均匀的CaP纳米颗粒,同时采用高分子对CaP进行改性,解决了其在水中不稳定、易聚集的缺陷,为其在生物医学方面更好的应用做出了贡献。
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