外周血清素对离体Sprague-Dawley大鼠成骨细胞的影响

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目的研究血清素与SD大鼠成骨细胞(Osteoblasts,OBs)的剂量相关性。方法(1)贴壁培养与分离新生大鼠颅骨细胞。通过观察细胞形态和荧光染色鉴定。(2)向P3代细胞培养液中混进不同浓度(10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、0mol/L)血清素干预。(3)第5天用MTT法分析干预因素与增殖的关系。(4)第10天分别用微量酶标法测碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)水平和免疫荧光法测Ⅰ型胶原蛋白(Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)水平分析干预因素与分化的关系。(5)第15天用ELISA法测骨钙素(Osteocalcin,OCN)水平,分析干预因素与分化的关系。统计学方法通过SPSS 20.0收集整理并分析数据。计量资料用均数±标准差((?)±s)表示,不同组间比较采用单因素方差分析,多组间两两之间比较采用LSD-t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果不同浓度(10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、0mol/L)血清素干预,MTT法测得平均光密度值分别为:0.400±0.028,0.379±0.023,0.379±0.047,0.401±0.038,0.420±0.038,0.618±0.064,任意组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);微量酶标法测得ALP平均水平分别为:0.046±0.002,0.017±0.002,0.026±0.002,0.046±0.002,0.051±0.002,0.073±0.003,任意组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光法测得Col-Ⅰ平均水平分别为:45.581±6.378,33.110±1.161,23.327±0.784,15.731±2.243,27.331±2.430,33.592±2.684,除10-6 mol/L组外任意组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ELISA法测得OCN平均水平分别为:3.002±1.639,1.711±0.370,2.193±0.551,2.439±1.469,2.703±1.175,8.021±3.036,任意组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清素对成骨细胞成负性效应,这种负效应与血清素浓度呈剂量相关性,随其浓度增高呈先强后弱关系。
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