【摘 要】
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随着胚胎工程技术在人类辅助生殖领域和家畜繁育领域中的应用,卵母细胞成熟的研究受到了极大的重视。研究发现,卵母细胞生发泡(Germinal Vesicle, GV)内染色质具有独特的构型
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随着胚胎工程技术在人类辅助生殖领域和家畜繁育领域中的应用,卵母细胞成熟的研究受到了极大的重视。研究发现,卵母细胞生发泡(Germinal Vesicle, GV)内染色质具有独特的构型并发生着动态的变化,随着卵母细胞的发育,染色质弥散的状态逐渐转变为凝集形态,这种转变标志着卵母细胞获得了成熟以及进一步发育的能力。本论文以Wistar大鼠为动物模型,使用Hoechst33342对大鼠GV卵母细胞进行染色,研究了大鼠卵母细胞GV染色质构型在卵子生长过程中的变化和不同染色质构卵母细胞的体外成熟能力。实验结果如下:1.根据生发泡内染色质凝集程度和分布情况,大鼠GV卵母细胞染色质构型分为以下4种:弥散构型(GV1)、部分环绕构型(GV2)、环绕加弥散构型(GV3)和环绕构型(GV4)。2. 17日龄的大鼠卵巢中开始出现环绕构型卵母细胞,环绕构型卵母细胞的比例随着日龄的增大而增加。3.在直径<40μm的大鼠卵母细胞中,只存在弥散构型的卵母细胞;直径达到60μm以上时,开始出现环绕构型和环绕加弥散构型的卵母细胞,比例随着直径的增大而增加;在直径>80μm的卵母细胞中,没有发现弥散构型的卵母细胞。4.对27-28日龄的大鼠进行PMSG激素刺激后,COCs+/+卵母细胞中环绕构型卵母细胞的比例显著增加。5.在发情期,卵母细胞中环绕构型卵母细胞的比例显著低于其它三个时期,而环绕加弥散构型的卵母细胞比例显著高于其它三个时期;在发情前期,环绕构型卵母细胞的比例显著高于其它三个时期。6.对3-4月龄的大鼠进行hCG激素刺激后18h到66h,COCs+/+卵母细胞中环形构型染色质的比例逐渐增加。7.环绕构型的卵母细胞在体外成熟中均能够发生GVBD,显著高于环绕加弥散构型的卵母细胞。8.大鼠卵母细胞在添加有HX的α-MEM液中培养24 h, 36 h和48 h,环绕构型卵母细胞的比例显著增高。
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