碱性成纤维细胞生长因子（human Fibroblast Growth Factor 2,hFGF2）在血管生成、细胞生长以及趋化组织修复细胞向创伤部位聚集等方面发挥着重要的调控作用。在2004年,hFGF2已经成为国家的一类创新型药物,用于治疗创伤修复以及慢性溃疡等皮肤疾病。但hFGF2蛋白单独作用于皮肤,其皮肤渗透性差和生物利用度低仍然是其药理应用的最大限制因素。因此,本课题组前期利用亚麻芥油体（Cob）作为hFGF2蛋白的表达载体,成功获得了Cob-hFGF2,并证明Cob可维持hFGF2蛋白的稳定性、加速hFGF2的透皮吸收、提高伤口愈合早期的愈合率以及对皮肤无过敏性反应。近年来,用于创伤修复的替代药物基本上是由植物的成分或植物材料的粗提物组成,其中的化学成分可能起协同作用,也可能对使用者产生一些影响,可能引起组织坏死、加重炎症程度以及延长炎症时间,损伤了表皮和真皮细胞,影响伤口愈合。因此,亚麻芥油体作为hFGF2蛋白的载体,其在细胞水平上是否会产生毒性和炎性作用尚不明确;植物油体是一种创新型载体,由于其具有亲脂疏水的特性以及人皮肤角质层具有富脂特征,Cob-hFGF2可作为皮肤外用药物。但Cob-hFGF2的皮肤药代动力学在其安全性、有效性和重要性方面的认识不足,因此,必须对Cob-hFGF2的皮肤药代动力学参数进行探究,以保证用药的安全性。因此,本研究以不同浓度Cob-hFGF2为研究对象,以人角质细胞系Ha Ca T和巨噬细胞系RAW264.7为细胞模型,在细胞水平上研究了Cob-hFGF2对Ha Ca T细胞的毒性作用以及对RAW264.7细胞的炎性作用;此外在动物水平上以SD大鼠为研究对象,建立皮肤渗透模型,对Cob-hFGF2局部给药的药代动力学进行初步探究,以明确其在皮肤代谢和血浆中的药代动力学特征,保证用药的安全性。具体研究结果如下:1.为了确证hFGF2蛋白成功表达在亚麻芥种子油体中,本研究利用Western blot技术检测了Cob-hFGF2的稳定表达;此外,定量结果表明,hFGF2蛋白在油体中的表达量为3.41±1.42μg/μl,占油体总蛋白的3.3%。2.为了明确重组Cob-hFGF2蛋白是否具有细胞毒性,本研究建立了蛋白浓度梯度,通过对HaCaT细胞进行给药处理,检测细胞的生物活性、细胞膜完整行、观察细胞的形态以及细胞损伤情况,结果表明,在检测浓度范围内,CobhFGF2对Ha Ca T细胞的生物活性没有影响,没有破坏细胞膜完整性,细胞的形态也没有发生变化,未检测到细胞损伤。因此,Cob-hFGF2对Ha Ca T细胞没有毒性作用。3.为了进一步研究Cob-hFGF2是否具有免疫原性,本研究利用细胞吞噬、NO分泌量及细胞因子释放量等实验方法,通过对RAW264.7细胞进行给药处理,结果表明,在检测浓度范围内,Cob-hFGF2对RAW264.7细胞的没有炎性反应。4.为进一步探究Cob-hFGF2经皮给药后的药代动力学特征,本研究利用ELISA方法,采集给药后大鼠的皮肤和血浆进行分析。单次局部给药Cob-hFGF2和hFGF2后,皮肤匀浆中hFGF2浓度随时间发生动态变化;0.5h达到最大值,4h后,浓度显著下降,6h后,皮肤中未检测到hFGF2的存在;hFGF2血浆浓度太低检测不到。经过计算得出,Cob-hFGF2和hFGF2的AUC（0-10）值别为5076h*pg/ml和3839h*pg/ml;Cmax分别为1525.61pg/ml和1504.44pg/ml,Tmax为0.5h。结果表明,外用Cob-hFGF2与hFGF2后,皮肤的药代动力学行为特征是一致的,且Cob-hFGF2的相对生物利用度为hFGF2标准品的130%。以上结果明确了Cob-hFGF2在皮肤和血浆中的药代动力学特征。