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胰腺癌是预后最差的肿瘤之一，平均5年生存率低于5％。尽管对胰腺癌的分子生物学的认识有了一些进展，但是详细的发病机理还有待于进一步探讨。K-ras基因的点突变在许多人类肿瘤中都可以发现，如结肠癌、肺癌、胰腺癌等。在所有的肿瘤中，胰腺癌的K-ras基因突变发生率最高，但是具体原因不明。 最近Wang等人应用PCR扩增和直接测序分析了20例中国台湾地区中国人的石蜡包埋胰腺癌组织的K-ras基因突变类型。结果显示20例中的18例有第12密码子的突变。在18个突变中除了一例为GGT-TTT突变外其它均为GGT-GTT突变。似乎K-ras基因的GGT-GTT突变在台湾地区的胰腺癌发生中有重要作用。 尽管国际上关于胰腺癌的K-ras基因突变率及其突变模式的报道比较多，但是很少有关中国大陆胰腺癌K-ras基因突变模式的报道。在本项研究中，我们检测了30例外科切除、福尔马林固定、石蜡包埋的胰腺癌组织的K-ras基因第12，13密码子的突变情况。胰腺癌中，肿瘤细胞经常被大量的非肿瘤的反应性纤维组织包绕。由于这些特性，我们很难得到足够量的纯肿瘤细胞以供分子生物学分析。为了获得较纯的肿瘤细胞，我们用1ml的一次性注射器在倒置显微镜下手工切割肿瘤组织。 另外，我们还分析了六株本实验室自建的中国人胰腺癌细胞系K-ras基因的突变情况。 显微切割，PCR和直接测序技术的结合可以很敏感地检测K-ras基因突变。30例胰腺癌中有25例(83％)发现K-ras基因的突变，25例K-ras基因的突变中除了一例是第13密码子(GGC-TGC)突变外，其余的均为第12密码子突变(11例为GGT-GTT，7例为GGT-GAT。4例为GGT-CGT，2例为GGT-TGT)。所有的结果都经反向测序证实。大多数的K-ras第12密码子突变位于第二个碱基(72％，18／25)，转换与颠换比例为1：1.57