【摘 要】
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研究目的: 前列腺癌在欧美国家是最常见的男性恶性肿瘤,在我国随着人口老龄化及饮食结构等多因素的改变,前列腺癌的发病率和死亡率呈迅速增长的趋势。前列腺癌的发病是与种族
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研究目的: 前列腺癌在欧美国家是最常见的男性恶性肿瘤,在我国随着人口老龄化及饮食结构等多因素的改变,前列腺癌的发病率和死亡率呈迅速增长的趋势。前列腺癌的发病是与种族、环境因素相关的多基因异常和动态演进的结果。前列腺癌骨转移是预后不良的标志,因此对肿瘤局部浸润和转移的分子机理研究正在成为肿瘤生物学研究的热点。 跨膜蛋白酶类执行细胞许多重要的功能,包括降解细胞外基质、水解或激活细胞表面的可溶性蛋白、介导细胞间黏附以及细胞的跨膜信号传导。细胞外基质的降解在肿瘤的浸润和转移中有重要作用。Hepsin基因编码一种Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶,是最近筛查发现的在前列腺癌中高表达的基因,但其在前列腺癌中的作用机制尚不清楚,需进一步的深入研究。Hepsin可能是一个新的前列腺癌的标志物和一个有前途的治疗靶点。本课题应用分子生物学的方法研究Hepsin基因在前列腺癌细胞系中对细胞的增殖和侵袭的作用。 研究分以下四个部分: 第一部分:Hepsin基因表达载体的构建及鉴定 目的 克隆人Hepsin基因,构建和鉴定表达载体。方法利用RT-PCR方法从人前列腺癌细胞系LNCap中克隆Hepsin基因全编码序列,并将其插入pIRES2-EGFP表达质粒,用酶切和测序方法对重组质粒进行鉴定。结果 成功克隆人Hepsin基因CDNA序列并构建了重组表达载体pIRES2-hep-EGFP。结论
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