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目的:对收集自儿童的111株非重复肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,Spn)菌株,进行儿童肺炎链球菌病例的流行病学特征及临床病例特点的分析;掌握儿童Spn的血清型及疫苗覆盖情况,对常见抗生素的耐药性以及三者之间的联系进行分析,以了解本研究中分离的肺炎链球菌菌株的血清型分布特点,为相关疫苗的研发和选用提供数据支持,同时为临床医生合理选择使用抗生素提供参考依据。方法:收集2017年1月-2018年12月河北省儿童医院分离的111株非重复肺炎链球菌,分析菌株来源病例的流行病学特征;通过Optochin敏感试验、胆汁溶解试验对菌株进行生化鉴定;通过多重聚合酶链式反应(Multiple Polymerase Chain Reaction,m PCR)对所有菌株进行血清群/型分型;通过普通PCR检测毒力、耐药基因携带情况;参照临床和实验室标准(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI),应用微量营养肉汤稀释法对收集菌株进行最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)值的测定以及药物敏感性的判定。结果:1.Spn菌株来源病例的基本特征:分离出111株肺炎链球菌菌株,菌株均分离自≤12岁儿童,5岁以下儿童95株,占比85.59%。73株来自诊断为侵袭性肺炎链球菌疾病(Invasive Pneumococcal Disease,IPD)的病例,38株来自诊断为非侵袭性肺炎链球菌疾病(Non-Invasive Pneumococcal Disease,NIPD)的病例。IPD的标本主要来源为患病儿童的全血(53株,72.60%)、脑脊液(16株,21.92%);NIPD的标本主要来源为患病儿童的五官分泌物(20株,52.63%)、脓液(16株,42.11%)。111株Spn中61株分离自男性,50株分离自女性,男女比例为1.22:1。2.Spn菌株的生化结果:111株菌株经Optochin敏感试验、胆汁溶解试验鉴定显示均为Spn,m PCR鉴定血清群的种属基因cps A出现特异性条带,进一步说明111株均为Spn。3.Spn菌株血清群/型的鉴定及疫苗的覆盖率:111株Spn菌株中,107株(96.40%)成功进行了血清分型,共检出17种血清型。主要的流行血清型为19F,其次为19A、14、6、23F。PCV7、PCV10、PCV13的血清型覆盖率分别为60.36%、67.57%、87.39%,三种疫苗的覆盖率在PDs、IPD和NIPD组差异均有统计学意义(P<0.05),PCV13疫苗的血清型覆盖率高于PCV7。对于2岁以上儿童PCV13疫苗、PPSV23疫苗覆盖率高于PCV7疫苗,而PCV13疫苗与PPSV23疫苗覆盖率差异无统计学意义。4.毒力基因与耐药基因携带情况:毒力基因lyt A、lyt B与nan A的携带率最高为100.00%,其次为pav、iga、ply与hys A,携带率分别为97.30%、95.50%、98.20%、92.79%,rrg A基因携带率较低为38.74%;红霉素相关耐药基因中,erm(B)基因、mef(A/E)基因携带率分别为96.40%和32.43%;四环素耐药基因tet(M)携带率为95.50%;氟喹诺酮耐药相关基因gyr A携带率为97.30%。5.耐药性:成功对110株Spn菌株进行耐药性检测。Spn菌株对万古霉素和左氧氟沙星敏感率为100%。大多数Spn菌株对利福平(99.09%)、氯霉素(90.91%)敏感,但大多数菌株对青霉素脑膜炎型(81.25%)、红霉素(100%)、克林霉素(96.36%)、多西环素(80.91%)、复方新诺明(58.18%)表现出较高的耐药性。89.09%的菌株出现多重耐药,多重耐药模式以红霉素/克林霉素/多西环素/复方新诺明为主。不同血清型对青霉素、多西环素、复方新诺明、氯霉素的耐药性差异有统计学意义(P<0.05),说明不同血清型的Spn菌株耐药性有差异。结论:1.本研究Spn菌株来源儿童病例中,从分类看以IPD病例为主,从年龄看以5岁以下儿童为主。2.本研究自2017-2018年中分离的Spn菌株主要流行的血清型为19F、19A、14、6、23F。PCV13疫苗的覆盖率达到87.39%,高于其他疫苗的覆盖率,本研究人群引入PCV13疫苗对于肺炎链球菌性疾病的防控有重要意义。在考虑经济条件时本地区2岁以上儿童除选用PCV13疫苗外还可选用PPSV23。3.本研究检测Spn菌株毒力基因中rrg A基因在血清型19A、19F中的携带率高于其他血清型。rrg A基因可能与血清型19A、19F的高发病率与高致病性有关。本地区红霉素、四环素耐药机制分别主要由erm(B)基因、tet(M)基因介导。4.本研究自2017-2018年中分离的肺炎链球菌菌株的耐药情况严重,红霉素、克林霉素的耐药情况严重,但对万古霉素、左氧氟沙星、利福平有较好的敏感性。本研究中Spn菌株存在严重的多重耐药现象,且不同血清型对不同抗菌药物的耐药性有差异。