海桐皮抗肿瘤有效部位制备工艺及质量研究

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本论文分为三部分:第一部分文献综述对用作海桐皮的不同植物来源的品种、化学成分、药理活性研究现状进行了综述。第二部分海桐皮有效部位的实验研究1.对四川产海桐皮进行了对照品研究。经过反复硅胶柱层析和制备HPLC法分离得到一个皂苷类化合物单体49.5mg ,利用波谱技术(包括UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR )鉴定其结构为:常春藤皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖-(1→2)-α-L-阿拉伯吡喃糖苷,经HPLC法测定纯度为99.2%。2.建立了海桐皮有效部位的制备方法。首先优化了海桐皮有效部位的提取工艺,以总皂苷含量为指标对提取工艺进行优化,经正交实验考察,确定最佳提取工艺为:确定最佳提取工艺为Q1%乙醇、用量为8倍量、提取2小时。继而对大孔树脂分离富集有效部位的工艺进行了筛选及优化。以总皂苷含量为指标,对树脂类型进行筛选,结果A树脂对有效部位中总皂苷吸附量大,解吸容易,有效部位的总皂苷含量高。通过对上样量与树脂体积的比、洗脱剂、层析柱径高比、上样液浓度、上样流速、洗脱流速、洗脱体积及使用寿命等参数的考察,确定最佳净化工艺为:树脂体积和上样体积的最佳比例为1:3.5,上样液浓度为20mg/ml,洗脱剂为Q3%乙醇,层析柱的D/L为1:5,吸附流速为1ml/min,洗脱流速为3ml/min,层析树脂至少可以重复使用8次。在优化的提取纯化工艺条件下制备了10批有效部位。3.建立了有效部位的HPLC指纹图谱检测方法。精密度实验考察结果表明:各共有峰相对保留时间的RSD在0.5—2.41%之间,峰面积比值的RSD6.28—7.78%;稳定性实验结果表明:供试品溶液在8h内稳定;重复性实验结果表明:各共有峰相对保留时间的RSD在0.15—1.07%,峰面积比值的RSD在4.02—
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