【摘 要】
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目的:探讨质谱技术对结核分枝杆菌复合群相关标记物检测和鉴定,判断VOCs标记物及VOCs指纹图对结核病的诊断和鉴别诊断价值。方法:采用表面解吸常压化学电离质谱(SDAPCI-MS)技
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目的:探讨质谱技术对结核分枝杆菌复合群相关标记物检测和鉴定,判断VOCs标记物及VOCs指纹图对结核病的诊断和鉴别诊断价值。方法:采用表面解吸常压化学电离质谱(SDAPCI-MS)技术对结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTC)及其相似菌属如非结核分枝杆菌(Nontuberculosis mycobacteria,NTM)、诺卡氏菌、马红球菌、链霉菌及龋齿罗氏菌的培养基上层行VOCs检测,同时对临床常见细菌和真菌检测,以确定MTC特异性标记物及释放时间规律。通过碰撞诱导解离(CID)技术鉴定特异谱峰的分子量和分子结构式,并用Matlab对其行主成分分析(PCA)以评估不同种属细菌VOCs之间的关系。结果:质谱检测所得VOCs指纹图可准确鉴别MTC与多种在生物学特性和临床感染上的相似菌属,主成分分析可将所有菌明显的相互区分。烟酸甲酯(m/z138)特异性存在于MTC培养基上层,在培养第9天,肉眼可见菌落之前即可检出。m/z 140和m/z 152在MTC培养基上层中含量显著高于其他菌属(P<0.01,Fisher’s精确检验),是MTC相关标记物。本实验中所有菌共同产生的VOCs主要有2-苯乙醇(m/z 122),甲酸乙酯(m/z 74),丙酸(m/z 76),苯甲酸(m/z 108),普遍存在于其他细菌培养基上层,是细菌在代谢过程中有机酸或醇类的积聚。结论:SDAPCI-MS通过检测微生物的挥发性代谢产物,快速、高效的作出MTC的判断,确定了MTC的特异性标记物烟酸甲酯。VOCs指纹图可用于相似细菌“气味”的鉴别。
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