大熊猫是我国特有的珍稀濒危动物,是世界自然基金会会标。西氏贝蛔虫则是专一寄生于大熊猫胃肠道的寄生虫,可引起宿主消瘦、贫血、腹痛、呕吐,伴有器官炎症表现,该病是造成大熊猫死亡的主要因素之一。现有诊断方法主要为虫卵漂浮法及PCR法,但两者均不能满足快速、简便、早期诊断等要求。而西氏贝蛔虫寄生于多菌环境下,其功能蛋白应用前景广阔。目前对该寄生虫功能基因的研究十分有限,本研究对西氏贝蛔虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因及抗菌肽基因原核表达,蛋白定位及初步应用,为大熊猫西氏贝蛔虫病的早期诊断及该虫功能蛋白应用提供方向。一、西氏贝蛔虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的原核表达及诊断价值初步评估丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员众多,功能不一,参与各种重要生理活动。在寄生虫已有作为疫苗或诊断抗原的报道。本研究原核表达了西氏贝蛔虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因（Baylisascaris schroederi serine protease inhibitor,BsSRP）,该基因ORF框全长441bp,编码蛋白16.06k Da;与犬弓首蛔虫同源基因序列相似性61%。免疫印迹显示该重组蛋白可被大熊猫西氏贝蛔虫阳性血清识别且条带单一。该蛋白主要分布于虫体体壁与虫卵。以此重组蛋白为诊断抗原的间接ELISA诊断方法敏感性为91.67%,特异性为100%,说明该蛋白具有诊断价值。二、西氏贝蛔虫抗菌肽基因的原核表达及抗菌活性初步评估抗菌肽是机体内重要的的免疫成分,能够发挥机体非特异性免疫功能,多为小分子阳离子蛋白质。寄生虫作为无脊椎动物主要依赖先天性免疫系统。本研究原核表达了西氏贝蛔虫抗菌肽基因（Baylisascaris schroederi Antibacterial factor,BsABF）,该基因ORF框全长276bp,编码蛋白10.01k Da;与猪蛔虫同源基因序列相似性为94%。免疫印迹显示该重组蛋白与大熊猫西氏贝蛔虫阳性血清呈单一反应。该蛋白主要分布于虫体体壁、肠道与虫卵。抗菌试验显示该重组蛋白具有抗菌活性。