【摘 要】
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脂肪沉积不仅对动物胴体品质和肉品质具有重要影响,而且对动物肠道健康和繁殖性能具有重要调控作用。因此,调控动物机体脂肪沉积对于提高动物产品品质、肠道健康和繁殖性能均具有重要意义。鱼油主要成分是n-3多不饱和脂肪酸（n-3 polyunsaturated fatty acids,n-3 PUFA）,以往对鱼油功能的研究主要集中在降低血脂、抗炎等方面,但对于鱼油在动物脂肪沉积、肠道屏障功能和繁殖性能中的
【基金项目】
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国家重点研发计划项目（2016YFD0500503）
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脂肪沉积不仅对动物胴体品质和肉品质具有重要影响,而且对动物肠道健康和繁殖性能具有重要调控作用。因此,调控动物机体脂肪沉积对于提高动物产品品质、肠道健康和繁殖性能均具有重要意义。鱼油主要成分是n-3多不饱和脂肪酸（n-3 polyunsaturated fatty acids,n-3 PUFA）,以往对鱼油功能的研究主要集中在降低血脂、抗炎等方面,但对于鱼油在动物脂肪沉积、肠道屏障功能和繁殖性能中的调控作用尚不完全明晰。因此,本论文的目的是研究日粮添加鱼油对雌性小鼠脂肪沉积、肠道屏障功能和发情周期的影响。实验选用48只6周龄的C57/BL6J雌性小鼠,随机分为对照组（Control）、鱼油组（Fish Oil）、高脂组（high fat diet,HFD）、高脂+鱼油组（HFD+Fish Oil）,每组12只小鼠,分别饲喂基础日粮、基础日粮添加5%鱼油（等能替换日粮中脂肪）、高脂日粮和高脂日粮添加5%鱼油（等能替换日粮中脂肪）。试验持续21周,每周测定小鼠采食量和体重,期间测定小鼠体脂含量、自发运动行为、整体能量代谢、褐色脂肪温度、直肠温度、肠道通透性、发情周期等指标,同时采集小鼠粪便,测定粗脂肪含量和能值。试验结束后采集血液、脂肪组织、肠道组织等进行相关指标检测。试验结果如下:1、日粮添加鱼油对小鼠脂肪沉积的影响:正常日粮添加5%鱼油可显著抑制采食量,减少小鼠能量摄入、排出。在HFD情况下,添加5%鱼油显著降低小鼠体重,减少能量排出和粪便中粗脂肪的含量;体组成结果表明:鱼油可显著增加饲喂正常日粮小鼠的体脂含量,但显著降低饲喂HFD小鼠的体脂含量及皮下、腹部脂肪沉积量;代谢笼结果表明:与正常日粮相比,HFD可显著降低小鼠产热量,而添加5%鱼油均可显著增加正常日粮和HFD饲喂小鼠的耗氧量、产热量;自发性运动结果表明:在正常日粮和HFD情况下,添加5%鱼油均可显著提高小鼠运动的平均速度和总运动距离;热成像结果显示:与正常日粮相比,HFD能降低小鼠褐色脂肪温度,但对直肠温度无显著影响。而正常日粮和HFD添加5%鱼油均可显著提高小鼠直肠、褐色脂肪温度;荧光定量PCR结果显示:正常日粮和HFD添加5%鱼油均能显著增加褐色脂肪和皮下脂肪中产热相关基因（UCP1、PRDM16、PGC1α、Cidea、Elovl3）的表达。以上结果表明,日粮添加5%鱼油可显著增强小鼠运动,促进褐色脂肪产热,增强小鼠能量代谢,减少饲喂HFD小鼠的脂肪沉积。2、日粮添加鱼油对小鼠肠道屏障功能的影响:H＆E染色显示:与正常日粮相比,HFD可降低空肠和回肠内绒毛高度与隐窝深度比值（V/C）。正常日粮添加5%鱼油对空肠和回肠的绒毛长与隐窝深的比值无显著影响,而添加5%鱼油可显著逆转HFD导致的空肠和回肠的V/C的降低;PAS染色表明:与正常日粮相比,HFD显著降低小鼠回肠内杯状细胞的数量与密度,而添加鱼油可显著提高HFD导致的杯状细胞数量的减少。肠道渗透性实验结果表明:与正常日粮相比,HFD可显著增加小鼠肠道通透性及血清内毒素水平,而添加5%鱼油可显著降低由HFD导致葡聚糖FITC-（Dextran）和内毒素浓度的升高。Western Blot结果显示:与正常日粮相比,HFD显著降低小鼠空肠、回肠紧密连接蛋白的表达,而添加5%鱼油可以显著提高HFD导致的紧密连接蛋白表达的降低。定量PCR结果显示:与正常日粮相比,HFD能显著升高小鼠空肠、回肠促炎因子IL-8、IL-6和IL-1β的表达,降低抗炎因子IL-10表达。HFD添加5%鱼油能显著降低促炎因子IL-8、IL-6和IL-1β的表达,增加抗炎因子IL-10的表达。以上结果表明,日粮添加5%鱼油可缓解由HFD导致的小鼠肠道屏障功能损伤。3、日粮添加鱼油对小鼠发情周期的影响:与正常日粮相比,HFD能显著延长小鼠的发情间期、缩短发情期,而添加鱼油可逆转HFD导致的小鼠发情间期的延长和发情期的缩短。小鼠发情统计结果显示,正常日粮或其添加5%鱼油的小鼠数正常发情率分别为81.28%和90.91%,HFD导致小鼠正常发情率显著降低（16.67%）,而添加5%鱼油可明显缓解HFD导致的小鼠正常发情率的降低（75%）。ELISA结果显示,与正常日粮相比,HFD显著降低小鼠血清中E2的水平,对促卵泡素（follicle stimulating hormone,FSH）的水平无显著性差异。正常日粮和HFD添加鱼油均可显著提高血清中E2和FSH水平。以上结果表明,日粮添加鱼油可以缓解高脂造成的发情周期紊乱,提高HFD导致的E2和FSH水平的降低。综上所述,本论文研究表明,日粮添加鱼油可增强小鼠能量代谢、降低脂肪沉积,同时可有效缓解由HFD导致的小鼠肠道屏障的损伤;此外,日粮添加鱼油还可改善HFD造成的小鼠发情周期的紊乱。以上研究结果揭示了鱼油在动物脂肪沉积、肠道屏障功能和发情周期中的有益调控作用,为鱼油在动物生产和人类健康中的应用提供了科学依据。
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