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随着人们生活水平的日益提高,心脑血管疾病发病率也越来越高,其主要原因就是摄入高胆固醇饮食导致了血清胆固醇含量增高。国内外大量研究表明双歧杆菌是一种具有良好降胆固醇能力的益生菌,本课题以贵州特色资源香猪肠道内溶物及粪便作为筛选源,筛选出一株降胆固醇能力高且耐酸受性、耐胆盐受性好的双歧杆菌,并对其培养基成份进行优化,得到最佳培养基组成成份,然后以海藻酸钠为壁材将双歧杆菌进行包埋,制备出双歧杆菌微胶囊。得到如下主要结论:(1)本实验以贵州特色资源香猪为筛选源,采用含有莫匹罗星锂盐的MRS培养基及涂布有X-gal的PTYG琼脂培养基进行初筛,结合双歧杆菌所特有的菌落形态及菌体形态,通过初筛实验,一共筛选得到70株双歧杆菌疑似菌株。(2)以胆固醇去除率为指标,采用邻苯二甲醛(OPA)法对初筛时得到的70株菌进行降胆固醇实验,并通过模拟人体的胃肠道环境,将降胆固醇能力高的菌株进行耐酸耐胆盐受性实验。最终得到一株降胆固醇能力高且耐酸耐胆盐受性好的菌株BZ11,其胆固醇去除率达到了38.52%,对该菌株进行形态学、16S rRNA序列分析,鉴定为动物双歧杆菌乳亚种。(3)对动物双歧杆菌乳亚种BZ11(CGMCC NO.10224)进行培养基成份优化,在单因素试验的基础上,采用PB试验设计对7个培养基成份进行考察,筛选得到了3个关键因素,然后利用快速登高试验以及Box-Behnken响应面设计试验确定关键因素的最佳浓度,以提高双歧杆菌菌体生长量。优化后得到的最佳培养基成分为:麦芽糖1.08%、葡萄糖0.89%、胰蛋白胨0.51%、大豆蛋白胨0.89%、酵母粉0.89%、胡萝卜汁14.33%和卷心菜汁17.78%。双歧杆菌菌体生长量OD600值达到最大为1.714,其活菌数达到了1011数量级,与优化前相比,其活菌数提高了一个数量级,且其降胆固醇能力提高了8.26%。(4)以海藻酸钠为壁材,对自筛菌动物双歧杆菌乳亚种BZ11(CGMCC NO.10224)进行包埋,制备出了双歧杆菌微胶囊,并对其进行人工模拟胃液、人工模拟肠液、人工模拟胃肠道环境等实验,得到所制备的微胶囊具有良好的耐酸环境及耐胆汁酸环境能力,其包埋率达到了87.89%,肠溶释放率达到了90.8%。