纺锤体极体（spindle pole body, SPB）作为酵母细胞的微管组织中心，它在细胞分裂及细胞遗传稳定性的维持过程中起着极其重要的作用，是细胞生物学领域热门的研究课题。Sfi1p是最新发现的酿酒酵母SPB的蛋白组分，其定位于半桥上并横跨整个半桥，对该蛋白功能及作用机制的探索，将有助于解决SPB研究过程中重要的科学问题，同时为其在高等真核细胞中同源蛋白的研究提供有用的指导。在本文工作中，对Sfi1p在酿酒酵母中的功能进行了研究。通过构建Sfi1p温度敏感突变，探索了酿酒酵母SPB组分Sfi1p在有丝分裂，减数分裂暨孢子形成和核配事件中的功能。通过易错PCR构建了SFI1温度敏感突变等位基因，并且相应的点突变位置经测序而确定。挑取不同突变位置的SFI1温度敏感突变等位基因通过FOA基因移换的方法整合至单倍体野生型菌株W303-1A中，得到了9株SFI1温度敏感突变株，其突变位置分布于N端，中间和C端三个区域。限制性温度下，在SFI1温度敏感突变株中过量表达SPB主要组分以筛选与Sfi1p具有遗传相互作用的SPB组分。实验中观察到过量表达SPC29可以抑制限制性温度下Sfi1p N端温度敏感突变株的表型，显示SPC29与SFI1之间存在遗传相互作用。有趣的是过量表达SPC29和SPC110还可以抑制Sfi1p C端缺失突变等位基因sfi1-p3引起的温度敏感表型，但是SPC29可能是通过SPC110而起作用。在随后的检测Sfi1p与其他SPB主要组分间是否存在相互作用的双杂交实验中观察到Spc29p特异性的与Sfi1p的N端有相互作用，并且是该实验中唯一被检测到的相互作用。在使用抗MYC抗体免疫沉淀Sfi1-MYC时，通过检测HA抗原的信号，发现同时沉淀中还有Spc29-HA，该结果表明酿酒酵母中Sfi1p和Spc29p可以结合形成蛋白复合体。Spc29p是一个磷酸化蛋白质但其磷酸化的生理意义还未研究清楚，免疫共沉淀实验中还发现与Sfi1p共沉淀的Spc29p主要以磷酸化的形式存在。这个结果暗示在SPB的复制以结构的及完整性等细胞过程中Spc29p的磷酸化可能是重要的调控机制。在限制性温度下，观察到在某些Sfi1p N端温度敏感突变株中Spc29-GFP的荧光信号与野生型菌株相比有极大的减弱，表明Spc29-GFP在部分Sfi1p N端温度敏感突变株中的定位被削弱。这个结果显示Spc29p在细胞中的定位至少部分依赖于Sfi1p N端的功能。考察了28℃下Sfi1p不同类型的温度敏感等位基因在二倍体菌株的生孢情况。结果显示Sfi1p C端的温度敏感突变即使在非限制性温度下，也会导致酿酒酵母细胞的产孢效率大幅下降，而且异常孢子含量增多。考察C端的单个温度敏感突变sfi1-778和sfi1-791纯合二倍体菌株——778D和791D——的二分体孢子的交配型发现，产生的二分体孢子中有很多是二倍体，其余主要是NSD（non-sister dyad）。这些结果表明Sfi1p C端在酿酒酵母的减数分裂和孢子形成两个阶段中均有作用。通过定量mating实验，观察到部分Sfi1p温度敏感突变株在非限制性温度下表现出明显的杂交效率低下，即二倍体合子形成缺陷。这一结果表明，Sfi1p在酿酒酵母的核配过程中也具有重要作用。