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【背景及目的】干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的未分化细胞,根据其来源可分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞(embryonic stem cells ESC)的研究由于受到伦理道德、种族观念的约束和潜在异体排斥反应的影响,其应用前景不是十分乐观。成体干细胞(adult stem cells ASC)因具有来源广泛、可塑性强、无排斥反应等优势已成为近年来研究的热点之一。目前已经在机体几乎所有组织中发现了成体干细胞,其中包括骨髓、软骨、血液、血管、神经、肌肉、脂肪、皮肤、角膜、肠、肝脏以及胰腺等。牙髓干细胞(dental pulp stem cells DPSCs)作为成体干细胞中较年轻的一员,于2000年首次由Gronthos等提出。他们把通过酶分离具有克隆形成能力的、高增殖率的人牙髓细胞命名为DPSCs。以后许多学者陆续发现人脱落的乳牙、猪、小鼠、大鼠等的牙髓中也有DPSCs的存在,并对其特性、定位、体外扩增进行了研究。DPSCs的发现,为牙髓损伤及修复机制的研究提供了一个新的平台,更为重要的是,为牙齿组织工程学带来了突破性进展。许多学者对DPSCs的特性、定位及扩增进行了研究,但常规二维(2-dimention 2D)培养费时、缓慢、占用空间较大、容易污染,已经影响了牙齿组织工程种子细胞的大规模扩增。近年发展起来的旋转细胞培养系统(rotary cell culture system RCCS)和微载体(microcarrier)相结合的三维(3-dimention 3D)培养方法,已广泛地应用于贴壁细胞的培养和扩增,为组织工程种子细胞的大规模扩增提供了可能。微重力组织工程(microgravity tissue engineering)是近年来由美国空间生物技术研究人员开创的一个独特研究领域,其核心技术是利用转壁式生物反应器(rotating wall vessel bioreactor RWVB)形成的模拟微重力(simulated microgravity)环境,进行动物细胞的三维培养。旋转细胞培养系统又称转壁式生物反应器,利用RCCS进行动物细胞三维培养时,由于旋转过程中正常的重力向量持续随即化,使细胞处于一种模拟自由落体状态,在一定程度上类似于微重力环境,因此称之为模拟微重力。本研究在对人DPSCs进行分离、培养和鉴定的基础上,利用微载体在RCCS中进