绿僵菌是一类重要的虫生真菌,能防治许多农林害虫。以绿僵菌作为生防因子的生物防治是控制椰心叶甲危害的重要措施。为获得适于田间应用的高毒力绿僵菌菌株,以及探索利用绿僵菌防治椰心叶甲的有效途径,本文包括了如下方面研究,从椰心叶甲僵虫和土壤样品中分离绿僵菌,并对分离菌株进行鉴定;测定部分分离菌株的生物学特性及其对椰心叶甲的毒力,以期从中获得高毒力优良菌株;确定不同寄主和地理来源的菌株系统发育关系并测定其对椰心叶甲的致病性,以期确定不同种绿僵菌菌株的致病性差异;测定拟除虫菊酯杀虫剂与绿僵菌混用对椰心叶甲的联合毒力,以期了解菌药混用对椰心叶甲的致死效果;分析不同菌株蛋白酶和几丁质酶活性与其对椰心叶甲毒力的相关性,以期探索一种高毒力菌株的筛选方法。主要研究结果如下:1.分别从椰心叶甲僵虫和土壤样品中获得了4个和36个绿僵菌菌株,实验结果表明,用添加650mg/L多果定和500mg/L氯霉素的选择性培养基可有效地从土壤中分离绿僵菌。2.所分离的40个绿僵菌菌株中20个为金龟子绿僵菌小孢变种Metarhizium anisopliae var.anisopliae,其余菌株为金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae。基于ITS1-5.8S-ITS2的rDNA序列数据所构建的最大简约树将Dz01菌株聚在金龟子绿僵菌小孢变种分支上,从而在分子水平上支持了该菌株为金龟子绿僵菌小孢变种。3. JF86C、JF883、JF813E等3个菌株在菌落生长速率、分生孢子萌发率、分生孢子耐热性等生物学性状上表现良好,且对椰心叶甲的毒力较其余5个供试菌株高,由此获得了3个适于进一步田间试验的菌株。4.不同变种的绿僵菌菌株对椰心叶甲致病性差异明显,其中金龟子绿僵菌小孢变种菌株对椰心叶甲致病性均较强,金龟子绿僵菌蚱蜢变种和黄绿绿僵菌瘿绵蚜变种菌株中仅个别菌株能感染椰心叶甲。这为高毒力菌株的进一步筛选提供了重要指导。5. 2种拟除虫菊酯杀虫剂与绿僵菌混合液对椰心叶甲协同致死效果显著优于单独绿僵菌悬浮液或低浓度拟除虫菊酯杀虫剂溶液,而且在低浓度下拟除虫菊酯杀虫剂与绿僵菌相容性较好,这为田间开展菌药混用防治椰心叶甲提供了重要信息。6.蛋白酶活性可作为不同绿僵菌菌株毒力高低的参考指标,但不能代替生物测定。几丁质酶活性与不同菌株对椰心叶甲成虫的LT50无相关性,但与其对幼虫LT50呈正相关,其原因有待进一步研究。