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本文记述了为检测疫苗残存牛血清而建立抗牛血清IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株及其分泌的抗体理化性质和生物学特性的鉴定过程。用牛血清IgG免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0在PEG作用下进行融合，培养上清用间接ELISA法筛选出能稳定分泌抗牛血清IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株，共获得4株，分别命名为1G5、2A8、3F5、4C5。通过琼脂双扩散鉴定证明：2A8为小鼠IgG2a，其余3株为IgG1；腹水ELISA效价分别达到1:2560000、1:1280000、1:640000、1:2560000；通过间接ELISA试验，除3F5株单抗与山羊血清有交叉反应外，1G5、2A8、4C5株与人和马、猪、羊、兔、豚鼠等血清均不发生交叉反应；同时证实4株单抗与制备病毒性疫苗的基质液呈阴性反应；相加指数测定证实4株单抗识别两种不同的抗原表位；WesternBlotting试验显示4株单抗均识别分子量为160KD的牛血清IgG；通过硫氰酸铵洗脱法比较4株单抗相对亲和力大小，依次为：4C5>2A8>1G5>3F5；4株单抗相对敏感度测定采用间接ELISA法，在抗体浓度均为5ug/ml时，能检出的牛IgG的量，在6.25ng/ml-50ng/ml之间，其中2A8、3F5、4C5单抗能检出牛IgG的量均<25ng/ml，比较相对敏感度高低，依次为2A8>4C5>3F5>1G5；4株杂交瘤细胞株的染色体计数为96、93、92、90；4株杂交瘤细胞株分别连续培养三个月以及冻存半年后复苏，细胞生长良好，4株杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。选取2A8株单抗包被，兔抗牛IgG作为夹心抗体，成功的建立了双抗夹心ELISA，来检测残存牛血清IgG，试验显示最低检出量为12.5ng/ml，选取0、6.25、12.5、25、50、100ng/ml浓度点牛IgG绘制标准曲线，曲线的相关系数R2值>98％。