论文部分内容阅读
高等真菌是一种分布广阔、种类庞大的生物类群。从高等真菌中发现了许多结构骨架新颖的化学成分,有些表现出重要的生物活性,许多已成为治疗人类重大疾病的药物或先导化合物。近年来,高等真菌的研究已愈来愈引起人们的高度重视。本文对两种高等真菌鳞盖肉齿菌Sarcodon scabrosus和簇生沿丝伞Naematoloma fasciculare的化学成分进行了提取分离、结构鉴定以及生物活性研究。通过硅胶、反相硅胶、Sephadex LH-20等色谱分离手段,分离出53个化合物。采用1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HMQC、HMBC和NOESY等1D、2D-NMR波谱学测试手段,结合ESI-MS、EI-MS、FAB-MS和HR-ESI-MS等技术,鉴定了41个化合物的结构,其中包括8个新化合物,分别命名为scabronine K、scabronine L、secoscabronine A、secoscabronine B、scabronine M、scabronine N、fasciculol H和fasciculol I;发现了2个具有神经营养活性的二萜化合物:sarcodonin A和sarcodonin G。并以sarcodonin A和G作为底物合成了25个衍生物,其中有23个为新化合物。主要研究结果如下:1.鳞盖肉齿菌Sarcodon scabrosus是一种云南哀牢山产的肉齿菌属蘑菇,从此菌子实体中共分离得到32个化合物,鉴定了25个化合物,其中1-1~1-6是新化合物,即:scabronine K (1-1)、scabronine L (1-2)、secoscabronine A (1-3)、secoscabronine B (1-4)、scabronine M (1-5)和scabronine N (1-6)。1-7~1-25为已知化合物,包括:sarcodonin G (1-7)、sarcodonin A (1-8)、sarcodonin M (1-9)、scabronine G (1-10)、scabronine H (1-11)、Sarcodonin I (1-12)、ergosta-7,22-dien-3β,5α,9α-trihydroxy-6-one (1-13)、3β,5α,9α- trihydroxy-6β-methoxyergosta-7,22-dien(1-14)、3-O-β-D-Glucopyranosyl-5α,8α– epidioxyergosta-6,22-diene (1-15)、cerevisterol (1-16)、tuberoside (1-17)、(2S,3R,4E,8E)- 1-(β-D-glucopyranosyl)-3-hydroxy-2-[(R)-2′-hydroxyheptadecanoyl]amino-9-methyl-4,8-octadecadiene (1-18)、过氧麦角甾醇(1-19)、Cholest-7en-3β-ol (1-20)、ergosta-7,22-dien-3β-ol (1-21)、麦角甾醇(1-22)、3β-hydroxy-24-methylcholesta-5,22- dien-7-one (1-23)、苯甲酸(1-24)和对羟基苯甲酸甲酯(1-25)。活性测试结果显示:sarcodonins A (1-8)和G (1-7)对大鼠PC12细胞具有神经营养活性:在神经生长因子(NGF) (20 ng/mL)存在,测试浓度为25μM下,能够显著增加NGF介导的PC12细胞轴突生长、分化及PC12细胞数目,可以使PC12细胞分化率分别提高24.9 %和20.0 %。2.簇生沿丝伞Naematoloma fasciculare是一种云南产的有毒蘑菇,从其子实体中共分离得到21个化合物,鉴定了16个化合物,其中2-1和2-2是新化合物,即:fasciculolH (2-1)和fasciculol I (2-2)。2-3~2-16为已知化合物:fasciculic acid C (2-3)、过氧麦角甾醇(2-4)、3-O-β-D-Glucopyranosyl-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-diene (2-5)、cholest-7-en-3β-ol (2-6)、ergosta-7,22-dien-3β-ol (2-7)、(2S,3R,4E,8E)-1-(β-D- glucopyranosyl)-3-hydroxy-2-[(R)-2′-hydroxyheptadecanoyl]amino-9-methyl-4,8-octadecadiene (2-8)、fasciculol B (2-9)、fasciculol A (2-10)、fasciculol C (2-11)、cerevisterol (2-12)、fasciculic acid F (2-13) fasciculol D (2-14)、fasciculol G (2-15)和3β-hydroxy-24-methylcholesta-5,22-dien-7-one (2-16)。XTT法测试化合物2-1、2-2、2-3、2-4、2-5及2-6对人脑恶性胶质瘤细胞株U87的细胞毒活性,在测试浓度为100μM下,其抑制率分别为:13.12%、3.66 %、24.45 %、31.71 %、20.06 %、10.94 %。只有过氧麦角甾醇(2-4)和3-O-β-D-Glucopyranosyl- 5α,8α-epidioxyergosta- 6,22-diene (2-5)表现出相对较好的活性。3.文献报道sarcodonin G具有抗肿瘤活性,能够抑制HeLa细胞增殖(IC50 7.19μM)。我们以sarcodonins G (1-7)和A (1-8)作为底物,制备了25个衍生物,其中23个为新化合物;采用海虾致死实验测定了这些衍生物的细胞毒活性,但衍生物对于海虾的致死率均低于20 % (100μM)。总之,本论文对两种大型高等真菌的化学成分和生物活性进行了研究,提取分离得到了8个新化合物,同时还发现了2个有神经营养活性的成分。本研究为活性先导化合物的发现奠定了基础,同时也为鳞盖肉齿菌和簇生沿丝伞这两种蘑菇的开发利用提供了实验依据。