戊型肝炎病毒(Fepatitis Evirus,FtEV)是无包膜的单正链RNA病毒，主要通过胃肠道传播，是引发急性戊型肝炎(Hepatitis E，HE)的病原体。目前HE尚无特效的抗病毒治疗药物，因此，HEV疫苗在HE防治中的作用受到人们的重视，而诱导具有保护作用的中和抗体是HEV疫苗的关键。在以往的研究中，我们利用His融合靶抗原的原核表达技术、抗原mapping技术和基于PCR的体外中和试验等发现，HEV中和抗原表位位于ORF2编码蛋白的第452至617位氨基酸之间，这为研制基于中和表位的HEV疫苗奠定了物质基础。 基因疫苗因其具有制备简单、性质稳定，经济以及由体内真核细胞表达的靶抗原具有与天然病毒抗原相似的构象结构等优点，而受人们关注并已用于HEV疫苗的研究。为进行基于HEV中和表位基因疫苗的研究，我们曾去掉原p166 N端His-tag并构建p166编码基因的真核表达载体，但实验结果发现：这些真核表达载体不能有效表达p166多肽、也很难在小鼠体内诱导明显的抗体应答。为此，我们又以p166为基础重新进行了抗原mapping试验，结果证实：不同的表达载体以及目的基因的长短直接影响靶抗原在体内、体外的表达，最终我们成功发现了能在真核细胞有效表达的、最短的、含中和抗原表位的p166的同源序列多肽-p179(位于ORF2编码蛋白第439-617位氨基酸)。 在本研究中，我们以pVAX为真核表达载体、HEV-ORF2<439-617>(p179)为靶基因构建重组质粒，以肌肉注射法进行基因免疫，观察该基因疫苗能否在小鼠体内诱导HEV特异性的体液免疫应答；在此基础上，我们拟在p179编码基因的5’端插入通用信号肽(tPA)编码序列，探讨真核表达载体产生的分泌性靶抗原能否增强基因免疫诱导的特异性抗体应答；同时，引入白细胞介素4(IL-4)作为基因免疫的分子佐剂，探讨IL-4对基于HEV中和表位-p179基因免疫诱导的免疫应答的增强作用。