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目的探讨固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulating element binding protein 1c,SREBP1c)是否与人蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)基因启动子结合,并通过调控PERK基因转录与表达,影响骨肉瘤细胞saos2和RCS发生增殖、凋亡和自噬的可能机制。方法构建人PERK基因启动子全长及一系列截短体报告基因载体,与内参质粒p RL-SV40和pc DNA3.1-SREBP1c、pc DNA3.1-SREBP1cm共转染骨肉瘤细胞后检测荧光素酶活性;运用Ch IP和EMSA方法检测SREBP1c与PERK启动子的结合作用;应用p WPT-GFP慢病毒载体系统,构建并包装慢病毒SREBP1c、SREBP1cm和PERK。感染细胞后,通过RT-PCR和蛋白质印迹法检测骨肉瘤细胞中PERK m RNA和蛋白的表达。应用衣霉素(Tunicamycin,TM)建立内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)模型,检测和探讨ERS状态下,SREBP1c、SREBP1cm与PERK对骨肉瘤细胞的增殖、凋亡和自噬的调控作用及可能的分子机制。结果pc DNA3.1-SREBP1c、pc DNA3.1-SREBP1cm上调PERK启动子的活性;Ch IP和EMSA证明转录因子SREBP1c直接与PERK基因启动子区域结合并调节PERK的转录与表达;成功构建并获得慢病毒SREBP1c、SREBP1cm颗粒;成功建立内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)模型;在ERS状态下,SREBP1c、SREBP1cm分组感染后,与对照组GFP相比较,SREBP1c、SREBP1cm可以不同程度的促进骨肉瘤细胞PERK及p-PERK的表达(P<0.05);过表达SREBP1c、SREBP1cm及PERK在未经TM诱导的情况下同样可以诱导内质网应激的发生;在ERS状态下,过表达SREBP1c、SREBP1cm和PERK都可以抑制骨肉瘤细胞的增殖、促进其凋亡和自噬;其中SREBP1c/1cm可以通过上调PERK的表达及磷酸化增强PERK对细胞增殖的抑制作用、促进PERK介导的细胞凋亡和细胞自噬。而在加入PERK信号通路抑制剂GSK2606414后,可以有效逆转SREBP1cm对PERK各项生物学功能的促进作用,即:GSK2606414有效逆转SREBP1cm促进PERK对细胞增殖的抑制作用、促进PERK介导的细胞凋亡和细胞自噬,证明SREBP1c调节细胞增殖、凋亡和自噬均是通过上调PERK表达及磷酸化激活相应的信号通路来实现的。结论SREBP1c转录因子通过直接与PERK基因启动子结合调节PERK基因的转录与表达;SREBP1c/1cm增强PERK对细胞增殖的抑制作用,促进PERK介导的凋亡和自噬;SREBP1c/1cm的这一作用依赖于PERK信号通路。