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为从转录水平研究永生化的小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞周期进程中的基因表达差异与功能,本文通过血清饥饿法建立NIH3T3细胞周期模型,用Mouse Genome 430 2.0芯片检测细胞周期过程中相关基因的表达丰度,用IPA软件、QIAGEN和KEGG PATHWAY等网站资料分析基因表达变化预示的信号通路对细胞周期进程的调节作用,并以c-FOS和NKX2-5为切入点,对NIH3T3细胞进行慢病毒转染,初步探究二者对小鼠成纤维细胞周期的调控作用影响。芯片数据分析表明,2349个基因的ratio值大于对照3倍,为上调基因。2255个基因的ratio值小于对照3倍,为下调基因。55个基因表达上下调。上述基因共计4659个,统称为有意义表达变化基因。GO注释分类表明,这些有意义表达变化的基因涉及细胞增殖和细胞周期等33种生理活动。在这些有意义表达变化基因中,有891个基因为细胞周期相关基因,其中的548个基因表达上调,336个基因表达下调,7个基因表现上下调。114个细胞周期信号通路相关基因发生了有意义的表达变化。基因协同作用(Ep(t)值)分析发现,主要5条信号通路PI3K,STAT3,钙蛋白酶,RHO家族鸟苷酸激酶,VEGF等信号通路(依次对应于促进G1期,G1/S转换期,S期,G2/M转换期和M期周期)促进NIH3T3细胞周期进程,它们调节的G1期、G1/S期、S期、G2/M期和M期生理活性与上述信号传导活动呈正相关。通过对芯片数据统计分析,以c-FOS和NKX2-5两个基因为切入点,用慢病毒转染法对NIH3T3细胞侵染,研究二者对该细胞的作用和影响。根据现有资料可知,这是首次系统并且全面地分析研究NIH3T3细胞周期信号传导过程。结果发现,只有c-FOS能在NIH3T3细胞中过量表达,NKX2-5在NIH3T3细胞中的表达量则极低。进一步查阅相关文献后得出结论,c-FOS基因不能诱导NIH3T3细胞恶性增殖,NIH3T3的细胞周期不会发生改变;NKX2-5不能诱导NIH3T3细胞发生转化。