【摘 要】
:
向日葵列当(Orobanche cumana Wallr.)是一种全寄生植物,主要寄生在向日葵(Helianthus annuus L.)的根部,严重影响向日葵的质量和产量,因此向日葵列当的防治十分重要。四跨膜蛋白(Tetraspanin,TET)广泛存在于哺乳动物、昆虫、真菌及植物中,调控细胞的多种生理过程,在发育和免疫应答中发挥重要作用。植物通过韧皮部运输TET基因特异性标记的外泌体(Exos
【基金项目】
:
内蒙古自治区科技计划项目(项目编号:2020GG0045); 国家自然科学基金(项目编号:31860055);
论文部分内容阅读
向日葵列当(Orobanche cumana Wallr.)是一种全寄生植物,主要寄生在向日葵(Helianthus annuus L.)的根部,严重影响向日葵的质量和产量,因此向日葵列当的防治十分重要。四跨膜蛋白(Tetraspanin,TET)广泛存在于哺乳动物、昆虫、真菌及植物中,调控细胞的多种生理过程,在发育和免疫应答中发挥重要作用。植物通过韧皮部运输TET基因特异性标记的外泌体(Exosomes)在植物细胞间进行远距离的信息交流。因此,本论文研究TET基因在向日葵-列当寄生过程中的作用,揭示了TET基因的转录调控机制,为向日葵列当的防治提供理论依据。本研究采用过表达和病毒诱导的基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术,以向日葵-列当这一寄生系统为基础,构建了一系列与外泌体特异性标记基因相关的4个TET基因HaTETE3、HaTET6、HaTET8和HaTET10的过表达载体和烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)干扰载体。通过种子浸泡农杆菌(Seed-soak agroinoculation,SSA)的方法侵染向日葵种子,随后接种向日葵列当,对列当吸器数目和生长表型进行了统计和分析,并通过RT-qPCR检测这些相关基因的表达量。主要研究结果如下:(1)首先对向日葵根部进行了外泌体的提取及鉴定,结果表明向日葵根部存在直径约为30~150 nm的外泌体。(2)利用RT-qPCR技术检测了上述HaTET基因在向日葵列当寄生前后的表达情况,结果表明向日葵列当寄生后上述HaTET基因表达量均显著上调。(3)过表达实验中以拟南芥中研究较多的AtTET8和AtTET9基因作为对照,结果显示HaTET基因过表达后列当接种数量增加,其中HaTET8过表达后形成吸器的数量增加最明显,增加了43.3%。干扰表达实验中HaTET基因沉默后列当接种数量显著下降,其中HaTET8沉默后形成吸器的数量减少最明显,减少了58.68%。(4)通过亚细胞定位发现HaTET3、HaTET6、HaTET8和HaTET10蛋白定位于细胞质膜。(5)克隆了HaTET基因的启动子序列并分析了其表达特性,并将其重组到含荧光素酶报告基因(LUC)的表达载体上,利用农杆菌介导的烟草瞬时表达系统检测HaTET启动子的活性。结果发现,不同侵染浓度(OD600=0.2、OD600=0.4、OD600=0.6、OD600=0.8)的ProTET:LUC农杆菌侵染烟草叶片均可驱动LUC报告基因表达。(6)通过外施1 mM水杨酸、1 mM GR24及列当粗提液处理向日葵植株,结果发现SA能够显著促进HaTET基因的启动子活性,而GR24和列当粗提液则对其活性起到抑制作用。
其他文献
限制性内切酶BstEⅡ(G/GTNACC)是生命科学基础研究的重要工具酶,其研究通常聚焦于酶的发现、分类和识别序列鉴定,而对限制性内切酶的结构、理化性质和工程改造研究尚不完善。BstEⅡ的多位点识别能力赋予其较大的改造潜力。为了探索BstEⅡ的结构与理化性质,拓展BstEⅡ在生物技术领域的应用,本研究采用生物信息学技术进行分析了BstEⅡ的化学性质、二级结构,并以穿线法预测其三级结构。利用凝胶过滤
近几十年来,肥胖已经成为越来越受关注的公共健康问题。大量研究数据显示,高脂饮食诱导的母源肥胖不仅会影响卵子的质量,而且与胎儿的不良发育密切相关,诸如早期妊娠失败及胎儿出生后缺陷等。有研究表明,妊娠期及哺乳期母体的健康饮食对子代的正常发育必不可少,胎儿宫内发育和儿童早期营养摄入的异常会大大增加成年后机体代谢疾病以及生殖系统疾病的发生风险。尽管已有研究证明母体高脂饮食会造成胚胎发育不良及影响后代的代谢
乌珠穆沁羊作为蒙古系绵羊品种之一,因具有肉质鲜嫩,营养价值较高等特点深受消费者的青睐。目前已有研究表明SCD和CDC10基因与脂肪酸(Fatty acid,FA)组成和脂肪沉积有关。SCD基因是饱和脂肪酸(Saturated fatty acid,SFA)去饱和成为不饱和脂肪酸(Unsaturated fatty acid,UFA)过程中的关键酶,影响FA的组成,进而影响肉的营养价值和风味;CDC
氧化应激是影响卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的主要因素之一,近年研究发现作为三羧酸循环中间产物的α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,α-KG)具有降低细胞氧化应激的作用,二甲基α-酮戊二酸酯(Dimethylα-ketoglutarate,DMKG)是α-酮戊二酸的前体化合物,它可以通过细胞膜进入细胞,被相应的酯酶水解成为α-酮戊二酸来发挥作用。本论文首先通过在体外成熟培养液中添加1.5
提升绵羊产羔数是家畜育种工作中的一个重要目标,与其相关的候选功能基因及分子遗传标记的挖掘一直是国内外学者的研究重点。蒙古羊和乌珠穆沁羊是我国优良的地方肉羊品种和宝贵的家畜遗传资源,具有耐严寒、耐粗饲、抓膘快和产肉性能好等优良性能,但由于其季节性发情且一胎单羔为主等繁殖力低的原始特性,限制了内蒙古现代草原畜牧业的高质量发展。随着分子生物技术的快速发展和分子标记辅助育种(marker-assisted
产羔数是绵羊重要的经济性状之一,决定肉羊产业的生产效率。提高产羔数是当前蒙古羊和乌珠穆沁羊育种的首要目标,因此挖掘与蒙古羊和乌珠穆沁羊繁殖力相关的关键候选基因及其多态性位点,从而利用分子标记辅助育种(Marker-assisted selection,MAS)技术提高蒙古羊和乌珠穆沁羊的繁殖力,是现阶段蒙古羊和乌珠穆沁羊产业发展的重点。有研究发现达维斯代尔羊(Davisdale sheep)的瘦素
产羔数是绵羊重要的经济性状之一,影响肉羊产业的生产效率。内蒙古的绵羊品种多数为一胎一羔、繁殖力较低,制约了草原畜牧业的高质量快速发展。因此,挖掘与内蒙古地区主要绵羊品种蒙古羊和乌珠穆沁羊产羔数相关的候选功能基因及其分子标记,进而利用分子标记辅助育种技术快速提高蒙古羊系绵羊的产羔数,是现阶段的内蒙古草原生态畜牧产业发展的重点。BMP15基因是影响绵羊产羔数的关键候选功能基因之一,对卵泡及卵母细胞的生
卵母细胞排卵后老化主要分为体外老化与体内老化,老化后的卵母细胞对受精效率及之后的早期胚胎发育产生影响,进而导致辅助生殖技术的成功率降低。但是排卵后卵母细胞老化导致卵母细胞质量下降的分子机制仍不清楚,值得我们进一步探究。在本研究中,我们将6周ICR(Institute of Cancer Research)雌性小鼠腹腔注射h CG(Human chorionic gonadotropin)超排后14
会计博士生教育是会计人才培养体系的重要组成部分。中国目前的会计博士生教育与新时代社会经济发展对会计人才的需求、教育部和财政部等主管机构对会计人才队伍发展规划以及高校“双一流”建设目标之间,尚存在一定差距。同时,会计博士生和博士生导师对改革当前教育现状的呼声越来越高。文章通过文献总结、问卷调查等方法,探讨并比较中美会计博士生教育现状及面临的问题,并对中国会计博士生教育改革与创新提出对策建议,以期为中
在全球范围内卵巢癌是影响女性健康的重要疾病。其早期症状不明显,筛查手段有限,诊断困难,治疗晚,预后情况不佳。卵巢透明细胞癌是上皮性卵巢癌的一种,属于恶性肿瘤,早期所占比例较大,5年的生存率较高,但是一旦发展到晚期,相比于卵巢癌其他类型生存率更低。临床上的治疗方案基本是参考卵巢浆液性癌。了解卵巢癌发病机制,能够更好地预测和筛查风险人群,同时识别潜在的病因有助于降低卵巢癌发病率。UBR5(Ubiqui