【摘 要】
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目的:研究Nrf2、Keap1在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用。方法:1.免疫组织化学法检测89例宫颈癌,46例CINⅡ-Ⅲ组织及66例正常宫颈组织中Nr
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目的:研究Nrf2、Keap1在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用。方法:1.免疫组织化学法检测89例宫颈癌,46例CINⅡ-Ⅲ组织及66例正常宫颈组织中Nrf2和Keap1蛋白的表达,分析其相关性及临床意义;2.实时荧光定量PCR技术检测宫颈癌HeLa,SiHa,C33a细胞中mRNA本底表达;3.构建Nrf2过表达质粒,上调C33a细胞中Nrf2表达,RNA干扰技术特异性沉默SiHa细胞中Nrf2表达,并通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测转染后mRNA和蛋白水平的变化,Transwell小室实验和流式细胞技术分析Nrf2对宫颈癌细胞迁移、侵袭、增殖和凋亡的影响。结果:1.宫颈癌组织中Nrf2的表达明显高于CIN和正常宫颈组织(P<0.05),Keap1在宫颈癌组织的表达显著低于CIN和正常宫颈组织(P<0.05),Nrf2的表达与淋巴结转移、肿瘤组织分化程度及临床分期有关(P<0.05);2.HeLa、SiHa、C33a宫颈癌细胞株中Nrf2 mRNA存在不同程度过表达;3.上调Nrf2的表达后,mRNA和蛋白水平的表达均上调,并促进肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移,对细胞凋亡无明显影响(P>0.05)。下调Nrf2的表达后,mRNA和蛋白水平的表达均下调,并抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡(P<0.01)。结论:1.Nrf2蛋白在宫颈癌组织和细胞中高表达,Nrf2蛋白的表达与Keap1表达密切相关。2.上调Nrf2促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,但对细胞的凋亡无影响。
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