【摘 要】
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基于本课题组前期已获得的转录组序列,采用RACE PCR(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆可能参与中华绒螯蟹短尾化过程的EsScr基因和EsAntp基因的全长cDNA序列,共获
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基于本课题组前期已获得的转录组序列,采用RACE PCR(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆可能参与中华绒螯蟹短尾化过程的EsScr基因和EsAntp基因的全长cDNA序列,共获得EsScr-1,EsScr-2,EsAntp-1和EsAntp-2四个亚基全长cDNA序列。并利用Real-time qPCR技术结合相关生物信息学方法对EsScr和EsAntp基因的基因序列、功能结构、理化性质及其在中华绒螯蟹胚胎与幼体10个发育时期(卵(心跳约90次/分钟)、蚤状幼体Ⅰ期、蚤状幼体Ⅱ期、蚤状幼体Ⅲ期、蚤状幼体Ⅳ期、蚤状幼体Ⅴ期、大眼幼体期、仔蟹Ⅰ期、仔蟹Ⅱ期以及仔蟹Ⅲ期)的mRNA差异表达情况进行全面分析。EsScr和EsAntp基因广泛地表达于中华绒螯蟹幼体不同的发育时期,伴随着短尾化过程(蚤状幼体V期至仔蟹Ⅰ期),EsScr基因mRNA的相对表达量在蚤状幼体Ⅴ期达到了较低点,较蚤状幼体Ⅳ期有明显的下降趋势(P<0.01),此后在大眼幼体时期又呈现明显的上升趋势(P<0.01);EsAntp基因mRNA的相对表达量在蚤状幼体V期达到了最低点,而在大眼幼体时期则呈现明显的上升趋势(P<0.01),实验结果表明EsScr和EsAntp基因可能参与中华绒螯蟹短尾化过程形态变化的调控。此外,EsScr基因和EsAntp基因在中华绒螯蟹适应生存环境渗透压的改变方面也可能发挥调节作用。
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