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背景:白念珠菌是人类真菌感染中最突出的真菌病原体,其致病率日渐升高而目前抗真菌治疗手段却不尽人意。因此有必要进一步研究白念珠菌的致病机制,寻找新的药物作用靶点。课题组首次报道SPT20基因是白念珠菌重要的毒力基因,其可通过多种途径调控白念珠菌的活力与毒力。目前罕有对白念珠菌SPT20的研究,其毒力对应的分子机制尚不清楚。但已有报道抗氧化损伤能力是白念珠菌毒力的重要体现,因此有必要评估SPT20基因在白念珠菌抗氧化损伤机制中的作用。目的:本研究拟通过基因、蛋白水平探讨SPT20基因在白念珠菌抗氧化损伤系统中的作用,进一步揭示其发挥作用的潜在分子机制。方法:我们在含有H202的YPD培养板上观察了白念珠菌野生株,SPT20缺失株和SPT20回复株的生长情况。然后利用DCFH-DA检测了有/无H202刺激下白念珠菌细胞内ROS的水平,并用试剂盒评估关键抗氧化酶的活性以及不同菌株细胞内[GSH/GSSG]比率。此外,通过RT-PCR评估白念珠菌STP20缺失株中氧化应答关键基因的转录情况,并且使用蛋白质印迹试验阐明Hogl的磷酸化水平。结果:连续梯度稀释试验提示,SPT20的缺失导致白念珠菌对外源性氧化剂H202的敏感性升高。与野生型菌株相比,SPT20缺失株菌体内ROS水平明显升高,而对清除ROS有关键作用的CAT活性明显降低。同时,体现白念珠菌氧化应激压力[GSH]/[GSSG]比率明显升高,SPT20缺失株面临更高的氧化损伤压力。RT-PCR结果显示,SPT20的缺失导致氧化应答相关基因(包括CAT1,和GLR1)的表达水平发生变化,且与上述结果相符合。蛋白质印迹分析进一步显示,SPT20的缺失显着增强了Hog1的磷酸化水平,说明其对白念珠菌调控氧化应答关键通路(Hog1-MAPK通路)产生了重要影响。结论:SPT20基因在白念珠菌氧化应答过程中发挥了关键作用,其对白念珠菌抗氧化酶系统、谷胱甘肽系统发挥正常功能是必需的,并且可能参与氧化应答相关通路的过程,为临床抗真菌治疗提供了潜在的靶点。