目的:本项目拟探讨紧密连接蛋白CLDN6通过Tyk2(tyrosine-protein kinase 2)/Stat3(Signal transducers and activators of transcription 3)信号通路调控结肠癌细胞sw1116迁移与侵袭的作用,为结肠癌治疗和控制转移提供新的靶点。方法:Western-Blot技术检测过表达CLDN6蛋白的结肠癌sw1116细胞中Tyk2以及Stat3总蛋白及磷酸化蛋白的表达水平;MTT法检测酪氨酸激酶抑制剂AG490对过表达CLDN6的sw1116细胞的最大安全剂量;Western-Blot技术检测AG490抑制Stat3磷酸化的最佳作用浓度和最佳作用时间;划痕实验、Transwell迁移及Transwell侵袭实验分别检测AG490对过表达CLDN6的sw1116细胞体外迁移及侵袭能力的影响。结果:与空载组相比,过表达CLDN6的sw1116细胞克隆组中Tyk2及Stat3的磷酸化水平明显升高;AG490抑制Stat3磷酸化的最适浓度和时间分别为50μM和48h;AG490处理克隆组细胞后,与对照组相比,过表达CLDN6的sw1116细胞形态由不规则铺路石样转变为梭形,且体外迁移与侵袭能力增强,划痕实验显示24h细胞迁移率增加,P=0.012<0.05;Transwell迁移实验24h细胞迁移数量增加,P=0.001;Transwell侵袭实验显示24h穿过Matrigel的细胞数量增加,P=0.0001<0.01。结论:1.过表达CLDN6增加sw1116细胞中Tyk2和Stat3蛋白酪氨酸位点磷酸化表达;2.CLDN6通过磷酸化激活Tyk2/Stat3信号通路抑制sw1116细胞的迁移与侵袭能力。