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生物活性肽是由氨基酸组成的具有生物活性的肽类化合物,一般是以植物或动物蛋白为原料制成。我国优质蛋白资源匮乏,高蛋白含量的生物活性肽作为一种新型蛋白资源,具有抗菌性、调节血清中血脂水平、促吸收、降血压等功能,同时还能增强机体免疫力、调节有机体生理机能。本课题以螺旋藻为主要原料,对螺旋藻蛋白酶解工艺、产品营养成分以及螺旋藻抗氧化组分分离鉴定进行研究,主要结果如下:(1)以螺旋藻为原料,选用蛋白酶K对其水解制备高活性多肽,确定最佳酶解工艺条件:料水比1:8、酶添加量700 U/g、酶解温度55℃、p H值8.5,酶解时间3 h。最佳条件下多肽转化率为43.31%,氨基酸转化率为11.82%,酶解液主要为2~7个氨基酸残基组成的多肽混合物。(2)根据优化的最佳工艺条件,进行酶解放大实验,对酶解放大实验的产品进行营养成分的分析。酶解后产品粗蛋白含量为66.55%,多肽含量为27.35%。原料中分子量>350 KDa的蛋白占69.16%,酶解后占12.99%;原料中分子量<1 KDa的多肽占28.33%,酶解后占62.60%。产品分子量主要分布在613 Da,约6个氨基酸残基。(3)对螺旋藻酶解液进行生理活性分析,发现酶解液具有较强的抗氧化性,分子量小于3 KDa的螺旋藻酶解液抗氧化活性最高,当浓度为100 mg/m L时DPPH自由基清除率可达到92.25%。通过凝胶过滤层析、反相高效液相(RP-HPLC)等技术手段对该分子量范围的螺旋藻粗肽进行分离纯化,获得一种高活性的抗氧化肽。经鉴定该抗氧化肽的氨基酸序列为脯氨酸-天冬酰胺-天冬酰胺(Pro-Asn-Asn,PNN),分子量343.15 Da。抗氧化肽Pro-Asn-Asn清除自由基的能力与还原型谷胱甘肽(GSH)相近,当浓度为100μg/m L,抗氧化肽Pro-Asn-Asn的DPPH自由基清除率为81.44%,GSH的DPPH自由基清除率为82.63%。