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一、背景:
近年来屈光手术发展迅速,准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situkeratomileusis,LASIK)由于术后视力恢复快、痛苦轻、视力的可预测性好等优点已经广泛用于临床,但是LASIK术后特有的角膜瓣相关的一系列并发症仍是目前LASIK运用的主要顾虑之一,其中角膜瓣的皱褶较为常见,但是还未在临床上引起广大眼科医生的足够重视。
目前国内外关于瓣皱褶仅局限于分类、病因病机、处理和预防等方面的临床研究,而针对瓣皱褶基础方面的研究报导甚少。故运用组织病理学方法(HE染色、PAS染色、Masson三重染色等方法)观察瓣皱褶组织结构和形态学方面的改变,对比LASIK术后和瓣皱褶术后愈合反应情况的不同,为指导临床提供可靠的科学依据是非常必要的。
二、目的:
通过组织病理学方法观察LASIK术后角膜瓣皱褶与正常LASIK组织形态,探讨瓣皱褶与LASIK术后创伤愈合反应的不同,为正确认识瓣皱褶的病因病机并指导临床做出理论依据。
三、方法:
新西兰白兔14只,全麻下右眼LASIK术后人为造成瓣皱褶作为实验组,左眼行单纯LASIK术作为对照组。分为7组,每组2只,于术后1天、3天、1周、2周、1月、3月和6月时随机选取一组处死取角膜,行苏木素-伊红(HE)染色、过碘酸-雪夫氏(PAS)染色和Masson三重染色,做组织形态学观察。
四、结果:
对照组术后早期光镜下见瓣上上皮及瓣下胶原纤维排列较为规则,上皮基底膜有细小皱褶,至术后二周时皱褶平缓并逐渐消失,PAS及Masson染色未见明显阳性深染。
瓣皱褶组光镜下见:术后一天时上皮基底膜呈不规则波浪形改变,至一周时瓣下层间交界面基质胶原纤维排列紊乱,角膜基质全层存在活化的角膜细胞,至术后二周时,上皮层数不等,在波峰处变薄为2~3层,波谷处可增厚至8~12层,还可见2/3全角膜基质胶原纤维出现与瓣上皱褶一致的波浪状走行,术后一月至六月上皮及基质部改变基本同前,瓣下层间模糊不可分辨。PAS示各期瓣下层间深染,Masson示瓣下层间呈棕色深染。
五、结论:
1、单纯LASIK术后与瓣皱褶的组织形态学区别
对照组术后上皮增生不明显,瓣下胶原排列规则,早期上皮基底膜存在细小波纹至中期自行平复,与正常角膜组织表现相似。皱褶瓣上皮不规则增生,在皱褶表面层数不等将皱褶表面填平,维持了角膜前表面的平整;术后二周时皱褶瓣形态对基质的重塑产生影响,不利于临床上皱褶的处理及视力的恢复。
2、瓣皱褶的演变过程
术后早期个别瓣下可见空隙或瓣边缘翘起,提示早期皱褶瓣易脱失稳定性差同时也是皱褶处理的最佳时间。中期皱褶瓣的皱褶走行影响到基质的重塑,可能由于上皮基底膜作用力量较强,基质部主动迎合基底膜而重塑,使得基质部分的胶原排列呈波浪走行与皱褶一致。角膜瓣皱褶的愈合反应过程较为缓慢迁延至六个月。
3、皱褶的类型及临床处理的指导意义
将皱褶按大小分类,微小皱褶(近20μm~40μm)可以发生于正常LASIK术后,随时间延长可自行平复;巨皱褶(近80μm~120μm)反应重且临床影响深远,不能自行平复甚至人为消除,故有必要进行长期研究。