电针心包经穴对MCAO/R大鼠海马区Nestin和MAP-2基因及蛋白表达的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:CallingCourage
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目的:观察电针心包经穴对MCAO/R大鼠神经功能缺损评分、脑梗死率和缺血脑组织海马区内巢蛋白和微管相关蛋白-2 m RNA和蛋白表达的影响,探索针刺心包经诱导内源性神经保护物质的产生及治疗脑缺血损伤、参与神经修复保护效应的可能机制,为“从心治脑”这一中医原创理论的科学内涵提供全新的阐释,为临床运用手厥阴心包经治疗脑缺血提供理论支撑和实验依据。方法:采用多次随机方式,将200只大鼠随机分为正常组40只,假手术组40只,造模组120只,造模成功后,将造模成功的大鼠随机分为心包经组、肺经组、模型组,每组40只大鼠,组内再随机分为1d、7d、14d、21d四个时相点。正常组、模型组、假手术组只做捆绑30min处理,心包经组、肺经组均在造模成功后电针刺激1次/天,每次30min。完成每次电针刺激后对大鼠进行神经功能缺损评分,各组按时相点完成治疗并处死大鼠。观察5组大鼠神经功能缺损的演变情况及脑梗死率变化,用免疫组化、PCR技术检测、Western Blotting法检测Nestin、MAP-2的m RNA和蛋白的表达。结果:1、神经功能缺损评分:脑缺血后,心包经组、肺经组、模型组大鼠的神经功能缺损评分均有不同程度的降低,但降低幅度有差异,其中模型组仅21d与1d时比有差异(p<0.05),而心包经组、肺经组的评分随着时间的延长逐渐降低(p<0.05,p<0.01)。与正常组及假手术组比,心包经组、肺经组、模型组的神经功能缺损评分均升高(p<0.01),但这三组在1d时的评分无明显差异(p>0.05),在7d、14d、21d各时相点的比较差异有显著性意义(p<0.05,p<0.01),表现为心包经组<肺经组<模型组。2、脑梗死率:与正常组、假手术组比,心包经组、肺经组、模型组在各时相点的脑梗死率均升高(p<0.01),但心包经组、肺经组、模型组之间比较差异无统计学意义(p>0.05),且这三组内各个时相点之间比较差异亦无统计学意义(p>0.05)。3、Nestin:脑缺血后,各组大鼠的Nestin表达均呈现一定规律,在7d时均达到高峰后逐渐降低,但降低幅度有差异,其中模型组在21d时回落至1d时的表达水平(p>0.05),心包经组、肺经组在21d时虽有降低,但仍明显高于1d时的表达水平(p<0.01,p<0.05)。与正常组、假手术组比,心包经组、肺经组、模型组的表达升高(p<0.01),心包经组、肺经组、模型组Nestin在1d时的表达无明显差异(p>0.05),在7d、14d、21d均有差异(p<0.05,p<0.01),表现为心包经组>肺经组>模型组。4、MAP-2:心包经组、肺经组、模型组大鼠在各个时相点MAP-2的表达均低于正常组和假手术组(p<0.01),心包经组、肺经组、模型组MAP-2在1d时的表达无明显差异(p>0.05),在7d、14d、21d时的表达表现为心包经组>肺经组>模型组,差异有统计学意义(p<0.01)。随着缺血时间的延长,各组大鼠的MAP-2均有不同程度的升高,差异有统计学意义(p<0.01,p<0.05)。结论:1、电针心包经、肺经均可降低MCAO/R大鼠神经功能缺损评分,并随着时间的延长评分逐渐降低,且心包经优于肺经。2、脑缺血后Nestin表达呈现一定规律,在7d时达到高峰后逐渐降低,而MAP-2的表达逐渐升高。电针心包经、肺经均可促进MCAO/R大鼠海马区Nestin和MAP-2的表达,且心包经优于肺经。3、电针心包经穴促进MCAO/R大鼠神经修复的机制可能与Nestin和MAP-2的表达上调相关。
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