目的:　　 皮肤是人体面积最大的器官,也是机体自我更新速度最快的组织之一,它是机体免于脱水、损伤、感染的第一道防线,是维持内环境稳定和阻止微生物、化学物质等侵入的屏障。尽早覆盖创面,恢复皮肤的屏障功能,十分重要。寻找理想的真皮替代物促进创伤愈合有重要作用,而真皮替代物中支架和种子细胞是关键。脂肪干细胞(adipose-derired stern cells,ADSCs)是具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体,即这些细胞可通过分裂维持自身细胞的特性和大小,又可进一步分化为各种组织细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。脱细胞羊膜(human acellular anmiotic membrane,HAAM)是一种很好的生物支架材料,它在其它前期临床的实验中表现出了很好的生物相容性,促近伤口愈合,更重要的是对各种损伤组织再生有特异的重塑性。小剂量胰岛素在创伤愈合过程中起着至关重要的作用,将三者联系在一起探讨对非糖尿病和糖尿病大鼠的创伤修复作用。　　 方法:　　 1.脱细胞羊膜制备　　 取健康剖腹产的人羊膜,生理盐水冲净血迹,反复漂洗。0.5%SDS,37度震荡过夜,0.25%胰酶消化24小时,反复PBS漂洗,冷冻干燥分装密封,环氧乙烷消毒,70度冰箱储存备用。　　 2.脂肪干细胞培养　　 3.脱细胞羊膜复合脂肪干细胞　　 4.造模取材　　 取40只大鼠随机分为四组,分别在后背部打一直径2.0cm的全层皮肤创伤的模型。A组为对照组只加生理盐水,B组为HAAM加生理盐水组,C组为HAAM+ADSCs加生理盐水组,D组为HAAM+ADSCs加胰岛素组。分别于7、14、28天取材计算创面愈合率并行HE染色和VEGF免疫组化染色观察对创面的愈合作用。另取50只大鼠,腹腔注射链脲佐菌素(streptocozin,STZ)以65mg/kg腹腔注射,3天后测血糖,如血糖＞16.7mmol/L则糖尿病大鼠模型建立成功,21天后血糖仍维持＞16.7mmol/L后,随机选取40只糖尿病大鼠分别于后背部打一直径为1.8cm的全层皮肤创伤的模型。分组同上。分别于7、14、28天取材,计算创面愈合率并行HE染色及VEGF免疫组化染色观察对创面的愈合作用。　　 结果:　　 两部分实验平行进行,无论是否糖尿病大鼠,小剂量胰岛素(6U)与脱细胞羊膜复合脂肪干细胞共同作用,均可明显缩短创面的愈合时间。于创伤后7、14、28天,观察发现A组创面愈合明显滞后,B组创面愈合率高于A组(P＜0.05),C组创面愈合率高于A、B组(P＜0.05),D组创面愈合率明显高于A、B、C组(P＜0.05)。组织形态学显示,在大鼠创伤修复早期,小剂量胰岛素与脱细胞羊膜复合脂肪干细胞,能够促进成纤维细胞增殖及新生毛细血管的形成,增强VEGF的表达。　　 结论:　　 小剂量胰岛素与脱细胞羊膜复合脂肪干细胞共同作用可明显促进创面的愈合。