中心体异常和食管癌发生相关性的实验研究

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背景与目的:中心体(centrosome)是一个微小的细胞器。Boveri作为中心体的先驱研究者首先将这个微小的细胞器置于聚光灯下,一个世纪以来,中心体这一微小的细胞器令无数细胞生物学家着迷。中心体由一对中心粒(centrioles)和中心粒周围物质(pericentriolarmaterial, PCM)组成。中心粒由九组三联体(或双联体,或单体,取决于细胞类型)微管组成,形成开放的桶状结构,每组三联体微管相互之间斜向排列,略似风轮。各亚微管又由13根直径约4.5nm的原纤维组成,中心粒内无中央微管,也无特殊的臂。中心粒的直径约为100-150nm,长度约为100-400nm,成对并彼此相互垂直排列。中心粒周围环绕着中心粒周围物质(pericentriolar material, PCM)和高电子密度物质(electron-dense material)。中心体的主要功能是作为主要的微管组织中心(microtubule organizing centres, MTOCs)。作为主要的MTOCs,中心体在维持细胞有丝分裂的忠实性和细胞极性上起着重要的作用。当中心体的结构和功能异常时,可引起细胞有丝分裂异常和细胞极性紊乱,并导致细胞染色体不稳(chromosome instability, CIN),最终导致恶性肿瘤的发生。本项实验通过对食管癌不同阶段中心体结构异常的研究,来探讨中心体结构异常在食管癌发生发展过程中的作用和意义,为临床医学提供诊断和治疗的基础理论依据。 材料与方法:从所收取的食管癌标本中随机选取同1例标本中同时具有食管癌不同阶段的标本(即同时具有正常食管粘膜,食管不典型增生,食管原位癌和食管癌4个阶段)进行中心体特性的详细研究。一抗为抗中心体周围蛋白多克隆抗体(Polyclonal Antibodyagainst Pericentrin),二抗分别为生物素化山羊抗兔IgG抗体(Biotinylafion Goat Anti-RabbitIgG Antibody)和FITC标记抗兔IgG抗体(Anti-Rabbit IgG Antibody, FITC Labeled)。中心体分别采用免疫组化和间接免疫荧光法进行染色。中心体分别采用免疫组化和间接免疫荧光
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