【摘 要】
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目的:通过模拟饥饿状态下肿瘤微环境,探究饥饿诱导的自噬与代谢重编程之间可能的调控关系,及其对膀胱癌细胞恶性进展影响。方法:利用免疫印迹、免疫荧光和透射电镜检测不同处理下膀胱癌细胞的自噬水平。利用乳酸和葡萄糖浓度检测试剂盒检测不同处理组膀胱癌细胞糖酵解水平。利用免疫印迹及PCR检测乳酸脱氢酶A（LDHA）表达情况;然后利用小干扰RNA沉默其表达,探索其对膀胱癌细胞恶性进展影响。通过生物信息学预测及免
【基金项目】
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81874092； ZHYX202010；
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目的:通过模拟饥饿状态下肿瘤微环境,探究饥饿诱导的自噬与代谢重编程之间可能的调控关系,及其对膀胱癌细胞恶性进展影响。方法:利用免疫印迹、免疫荧光和透射电镜检测不同处理下膀胱癌细胞的自噬水平。利用乳酸和葡萄糖浓度检测试剂盒检测不同处理组膀胱癌细胞糖酵解水平。利用免疫印迹及PCR检测乳酸脱氢酶A（LDHA）表达情况;然后利用小干扰RNA沉默其表达,探索其对膀胱癌细胞恶性进展影响。通过生物信息学预测及免疫印迹、免疫荧光和免疫沉淀等方法验证,探究具体机制。结果:饥饿诱导膀胱癌细胞自噬增强后,通过转录水平上调LDHA表达从而调控糖代谢重编程,并引起膀胱癌细胞的恶性进展。机制上,饥饿处理后膀胱癌细胞自噬增强,Axin1蛋白与P62结合并通过增强的自噬-溶酶体途径进行降解;Axin1蛋白减少抑制β-catenin磷酸化修饰,引起游离β-catenin核转位增加,促进LDHA转录表达。同时还发现膀胱癌组织中LDHA呈高表达,并且其表达量与肿瘤恶性程度呈正相关。结论:我们的研究表明,饥饿诱导的自噬通过增强膀胱癌细胞中Axin1降解和β-catenin核转位来调节糖代谢重编程,从而促进LDHA的转录表达及膀胱癌恶性进展。
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