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目的: 本研究基于中医补肾益髓法对缺血性脑卒中的治疗，通过观察仙茅中主要成分仙茅苷干预缺血性脑卒中的模型大鼠，并从脑组织损伤动态变化以及清除自由基、抑制炎症因子及对PI3k/AKt信号通路的影响几个方面，用现代生物医学研究手段，探讨仙茅苷治疗脑缺血的分子机制。 方法: 1.实验动物及分组:选用健康成年雄性Wistar大鼠，根据大鼠神经功能评分将造模成功大鼠随机分成脑缺血模型组和仙茅苷高剂量和低剂量治疗组，同时设假手术组。 2.药物制备:50mg仙茅苷溶于生理盐水，过滤除菌，4℃保存备用。 3.造模方法:采用大鼠大脑中动脉栓塞法(MCAO)复制局灶性脑缺血模型。 4.各组处理:于术后第2d起，对仙茅苷高剂量和低剂量治疗组分别以仙茅苷水溶液按50mg/kg体重和10mg/kg体重尾静脉注射，每日1次，假手术组和脑缺血模型组大鼠每日尾静脉注射等体积注射用水，共7d。对各组大鼠缺血区脑组织进行组织学检测;分光光度法测定其过氧化氢含量、一氧化氮及丙二醛含量及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及一氧化氮合成酶活性;酶联免疫吸附试验法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1)含量;免疫组织化学法检测细胞间黏附分子-1、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K)、Akt及细胞核因子(NF-κB)的表达;RT-qPCR检测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导性-氧化氮合酶(iNOS)、肿痛坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞间粘附因子(ICAM-1)、PI3K、Akt及NF-κB mRNA表达水平;Westen Blot法分析PI3K、pPI3K、Akt、pAkt和NF-κB蛋白表达情况。 结果: 1.仙茅苷治疗组大鼠缺血区脑组织坏乡死情况较模型组有不同程度的改善，神经功能评分NSS评分明显低于模型组，差异有统计学意义(P＜0.05); 2.与假手术组比较，MCAO模型组大鼠缺血区脑组织H2O2、NO和MDA含量增加，SOD和CAT活力降低且其mRNA表达亦明显降低，nNOS及iNOS活性及mRNA表达明显增加，差异均有统计学意义(P＜0.05);与MCAO模型组比较，仙茅苷治疗组大鼠缺血区脑组织H2O2、NO及MDA含量明显降低，SOD和CAT活力增加且及其mRNA表达亦明显增加，nNOS及iNOS活性及mRNA表达明显降低，差异均有统计学意义(P＜0.05)。 3.与假手术组比较，MCAO模型组大鼠缺血区脑组织TNF-α和IL-1含量明显增加，TNF-α、IL-1β和ICAM-1mRNA表达量亦明显增加，差异有统计学意义(P＜0.05);与MCAO模型组比较，仙茅苷治疗组大鼠缺血区脑组织TNF-α和IL-1含量、TNF-α、IL-1β和ICAM-1mRNA表达量明显降低，差异均有统计学意义(P＜0.05)。 4.与假手术组比较，MCAO模型组大鼠缺血区脑组织NF-κB p65蛋白及mRNA表达量明显增加，PI3K和Akt的蛋白及mRNA表达量均明显降低，差异均有统计学意义(P＜0.05);与MCAO模型组比较，仙茅苷治疗组大鼠缺血区脑组织NF-κB p65蛋白及mRNA表达量均明显降低，PI3K和Akt的蛋白及mRNA表达量均明显增加，差异均有统计学意义(P＜0.05)。 结论: 1.仙茅苷可增加缺血区脑组织SOD和CAT的活性及转录水平，降低NOS的活性及转录水平，从而加速MDA、H2O2及NO等自由基的清除，减少缺血区脑组织自由基含量，促进脑损伤的修复。 2.仙茅苷可抑制缺血区脑组织TNF-α、IL-1β和ICAM-1的转录和翻译水平，减轻炎症因子对脑组织的损伤，加速受损脑组织形态和功能的恢复。 3.仙茅苷可促进缺血区脑组织PI3K、Akt的转录和翻译，即激活PI3K/Akt信号转导通路，激活的PI3K/Akt通路可通过抑制NF-κB的转录和翻译、抑制氧化应激反应、抑制炎症反应等机制保护脑组织的结构和功能。 本研究结果为阐明仙茅苷抗脑缺血的分子机制及其通路研究提供了科学依据，为仙茅苷的二次开发和扩大仙茅的临床应用提供了参考。