ND2:SmoA1转基因荷瘤小鼠的培育、鉴定和脑血管成像研究

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恶性颅内肿瘤是致死率最高的恶性肿瘤之一,其中髓母细胞瘤是儿童群体中最常见的神经系统恶性肿瘤。对于癌症研究来说,在小鼠上创建可靠的疾病模型对疾病诊断以及治疗手段的开发与完善有着重要作用。目前对于恶性颅内肿瘤,外科手术介入依旧是预防和治疗癌症症状的关键手段。研究表明,广泛,精准的手术切除可以大大延长脑瘤病人尤其是高级别恶性胶质瘤病人的生存期。近年来,利用肿瘤荧光标记物实现肿瘤诊断以及实时成像指导手术切除成为一项提高肿瘤清除精度与患者术后生存期的重要技术。而半导体聚合物纳米颗粒(semiconducting polymer nanoparticles,SPN)由于其作为荧光探针的多种突出优点引起了相当大的关注,在该领域拥有巨大的潜能。本文的主要内容是对The Jackson Laboratory公司的髓母细胞瘤模型,ND2:SmoA1转基因小鼠进行繁育以及基因与表型鉴定,证明了该模型产生脑瘤的能力。通过静脉注射,对荷瘤小鼠脑部血管进行基于合成的半导体共轭聚合物纳米材料的近红外二区荧光成像实验,证明了该材料的脑部血管成像能力以及作为原发性颅内恶性肿瘤模型在开发脑瘤实时成像系统方面的应用潜能。本文通过纳米沉淀法合成了半导体共轭聚合物纳米材料,通过对其吸收发射以及生物兼容性的表征实验证明其具有高量子效率以及优秀的近红外二区成像能力。在繁育该品系小鼠时使用了纯合ND2:SmoA1公鼠与C57野生型母鼠交配,再通过子代自交与定量PCR基因鉴定技术筛选出纯合ND2:SmoA1小鼠。与直接使用纯合ND2:SmoA1小鼠交配繁衍后代的方法相比,大大增加小鼠扩群速度的同时,规避了ND2:SmoA1纯合母鼠在怀孕以及哺育后代期间因脑瘤发病死亡的风险。在此基础上,本文完成了对早期与晚期荷瘤小鼠的脑部近红外二区荧光成像实验,与对照组正常小鼠数据对比可明显分辨小鼠是否荷瘤,并通过病理切片进行了验证。未来通过此模型与先进的半导体纳米成像材料配合,有望进一步开发出精准可靠的颅内肿瘤实时成像系统。
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