假丝酵母富硒工艺及酵母硒在大鼠上的应用效果研究

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本研究拟利用廉价的糖蜜和尿素作为发酵底物研制富硒酵母,并通过优化富硒酵母发酵工艺生产低成本的酵母硒产品;在此基础上应用大鼠作动物模型,评定了本项目研制的酵母硒在大鼠上的应用效果。试验一富硒酵母菌的研制和发酵工艺的优化本试验通过耐硒和富硒酵母的筛选得到了富硒能力较强菌株Se60-2,然后对培养基蔗糖糖蜜和尿素浓度进行了优化,并采用单因素试验设计考察了不同加硒浓度、加硒时间、发酵时间以及加硒方式对酵母富硒的影响。结果表明:摇瓶发酵培养时,糖蜜4.5%、尿素4g/L、发酵第20h添加15mg/L硒、培养60h后菌体生物量和硒含量最高,分别为10.95g/L和585mg/kg;在30L发酵罐中,加硒浓度为24mg/L时酵母生物量和总硒量都超过摇瓶发酵水平,分别达到17.41g/L和8161μg/L。本研究所得酵母硒单位硒成本为19.6元/g,低于目前生产上使用的酵母硒,具有较大的生产和应用价值。试验二酵母硒在大鼠上的应用效果研究本试验旨在考察不同硒源和水平对大鼠生长性能、血清生化指标及组织硒沉积的影响,并以亚硒酸钠和商品酵母硒(酵母硒B)为参比对本课题组研制的酵母硒(酵母硒A)生物学效价进行评定。试验选用82只6周龄左右的Wistar雌性大鼠,随机选择6只饲喂以亚硒酸钠形式添加0.2mg/kg硒的饲粮作为耗竭对照,剩余76只饲喂不添加硒的基础饲粮进行耗竭试验,2周后将耗竭对照组的6只大鼠以及从耗竭大鼠中随机选择6只进行屠宰,考察大鼠的硒耗竭状况。余下70只经硒耗竭的大鼠称重后随机分到10个处理,每个处理7个重复,每个重复1只大鼠,分别饲喂不同处理的饲粮21d。处理1不添加任何形式的硒源,处理2-9在基础饲粮中分别以亚硒酸钠或酵母硒A的形式添加0.1、0.2、0.3和0.4mg/kg硒,处理10以酵母硒B形式添加0.3mg/kg硒。结果表明:1)不同硒源及硒水平对大鼠生长性能、血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性影响差异不显著(P>0.05);2)组织硒含量随饲粮硒水平的升高极显著增加(P<0.01),添加酵母硒A组大鼠肝脏和肾脏硒含量显著高于亚硒酸钠组(P<0.05);3)以亚硒酸钠为参比,血清GSH-Px活性及肝脏、肾脏和肌肉硒含量作为判定指标,酵母硒A的相对生物学效价分别为95.9%、127.5%、114.5%和101.2%;4)添加酵母硒A和酵母硒B对大鼠生长性能、血清抗氧化能力的影响差异不显著(P>0.05),但添加酵母硒A组大鼠肾脏硒含量极显著高于酵母硒B组(P<0.01),而酵母硒B在肌肉中有更多的硒沉积(P<0.01)。结果提示:1)硒源对大鼠组织硒沉积有较大影响,酵母硒相对于亚硒酸钠具有更高的生物学效价,但不同酵母硒之间存在一定的差异;2)饲粮硒水平对大鼠血清抗氧化能力影响较小,以血清GSH-Px活性为衡量标准,饲粮中添加0.1mg/kg硒的酵母硒和亚硒酸钠都能满足大鼠的需要,但更高水平的酵母硒可以使大鼠组织中有更多硒的沉积。总体结论:1)以4.5%糖蜜和4g/L尿素作为富硒发酵培养基的碳源和氮源能较大程度的降低酵母硒的生产成本。2)与亚硒酸钠相比,本试验研制的酵母硒具有更高的生物学效价,且与目前市售商品酵母硒具有相似的效果。3)大鼠生长性能和抗氧化能力不受硒源和硒添加水平的影响,但提高酵母硒添加水平可以增加机体对硒的储备。
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