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猪精子在冷冻解冻过程中极易遭受活性氧(ROS)的攻击,而且由于精子之间的相互黏附作用,使其在冷冻解冻后精子的活力远远不如鲜精,为了克服这种不利影响,可以通过在猪精液冷冻稀释液中添加抗氧化剂或其他物质来阻止或者是防止氧化应激以及黏附作用的发生。本研究以长白猪为试验对象,通过在稀释液中单独或混合添加明胶以及各种抗氧化剂的试验方法,采用0.5mL细管对猪精液进行冷冻。结果表明,在猪精液冷冻稀释液中分别加入200U/mL SOD、0.5mg/mL GSH、0.05mg/mL MLT,能够显著提高精子活力、活率、质膜完整性、顶体完整性及DNA完整性(P<0.05)。联合添加100U/mL SOD X0.5mg/mL GSH后精子的质量显著高于其他联合添加组,且极显著优于单独添加200U/mL SOD、0.5mg/mL GSH和0.05mg/mL MLT (P<0.01),精子穿透去透明带仓鼠卵的效果(70.00%)也极显著优于单独添加组(P<0.01)。另外,首次在猪精液冷冻稀释液中添加明胶。结果表明不同浓度的明胶均能提高解冻后精子质量和精子穿卵率,添加0.36mg/mL、0.54mg/mL的明胶均能极显著提高解冻后精子活力、活率、DNA完整率和精子受精率(P<0.01),但两种浓度之间差异不显著。添加0.36mg/mL、0.54mg/mL的明胶均能极显著提高精子质膜完整率(分别是56.86%,55.29%),且两种浓度之间差异显著(P<0.05)。添加不同浓度的明胶均能显著提高解冻后精子顶体完整率(P<0.05),其中0.36mg/mL的明胶效果最佳。因此,在猪精液冷冻稀释液中单独添加0.36mg/mL的明胶或者联合添加100U/mL SOD和0.5mg/mL GSH,均能提高冷冻解冻后精子的质量和精子受精率,进而建立一个有效的猪精液冷冻保护体系,增强精子抗冷冻能力,提高猪冷冻精液的质量,为推动冻精在人工授精领域的应用奠定基础。