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研究背景：多发性骨髓瘤（MM）是浆细胞恶性增殖性疾病，骨髓中克隆性浆细胞异常增生，并分泌单克隆免疫球蛋白或其片段（M蛋白），并导致相关器官或组织损伤。常见临床表现为骨痛，贫血，肾功能不全和感染等。此病约占造血系统恶性肿瘤的10%，并有逐年增加的趋势。目前临床上仍以化疗作为本病的主要治疗手段，尽管新的化疗药物如蛋白酶体抑制剂的应用明显提高了患者的生存期，但是MM仍然是难以治愈的恶性血液病。肿瘤的发生是细胞进行无限制的自主分裂和增殖引起的，并且细胞周期的演进是肿瘤发生的“最后通路”。人为通过改变调控物的作用可阻止恶性肿瘤细胞周期的演进，进而抑制肿瘤细胞的无限制自主分裂和增殖。研究细胞周期调控机制的功能，可以为肿瘤基因治疗提供有效的治疗靶点。目的：本实验旨在研究细胞周期蛋白D三种亚型（CyclinD1，CyclinD2，CyclinD3）及p27蛋白在MM中的表达情况及相关性，探讨它们在MM发生、发展及转归中的作用及机制。方法：本实验采用免疫组织化学方法，检测10例缺铁性贫血患者（对照组）和80例MM患者骨髓组织中CyclinD1，CyclinD2，CyclinD3和p27的蛋白表达水平及相关性。在MM组中根据病理分期不同将80例标本MM骨髓组织分为Ⅰ期组（25例）、Ⅱ期组（20例）和Ⅲ期组（35例），观察各组（分期组）MM标本蛋白表达的情况及与疾病的关系。在MM组中根据免疫球蛋白检测类型不同将80例标本MM骨髓组织分为IgG组（33例）、IgA组（23例）、轻链组（19例）和IgD组（5例），观察各组（分型组）MM标本蛋白表达的情况及与疾病的关系。在MM组中根据治疗后预后情况分为缓解组（CR组43例）和未缓解组（NR组37例），观察治疗前后MM骨髓标本蛋白表达的情况及与疾病预后的关系。结果：1.CyclinD1在对照组骨髓组织中低表达，10例对照组标本1例阳性表达，阳性率10%。而80例MM骨髓组织中46例阳性表达，阳性率57.5%，与对照组骨髓组织表达有明显差异（p＜0.05）。在MM的分期分组中，随着MM病理分期的增高CyclinD1的表达及强度增加（p＜0.05）。在MM的分型分组中，CyclinD1与疾病分型无明显趋势（p＞0.05）。在MM的预后分组中，治疗前，CR组和NR组CyclinD1的表达及强度无明显差异（p＞0.05）；治疗后，CR组CyclinD1的表达及强度明显低于NR组（p＜0.05）。2. CyclinD2在10例对照组标本无阳性表达。而80例MM骨髓组织中31例阳性，阳性率38.75%，与对照组骨髓组织表达有明显差异（p＜0.05）。在MM的分期分组中，随着MM病理分期的增高CyclinD2的表达及强度增加（p＜0.05）。在MM的分型分组中，CyclinD2与疾病分型无明显趋势（p＞0.05）。在MM的预后分组中，治疗前，CR组和NR组CyclinD2的表达及强度无明显差异（p＞0.05）；治疗后，CR组CyclinD2的表达及强度明显低于NR组（p＜0.05）。3. CyclinD3在对照组骨髓组织中无表达。而在80例标本MM骨髓组织中仅有12例出现阳性低表达（+），阳性率15%。由于阳性例数较少未进行MM组内的各分组比较。4. P27在对照组中高表达，10例对照组标本9例阳性表达，阳性率90%。而80例MM骨髓组织中30例阳性表达，阳性率37.5%，明显低于对照组骨髓组织的表达（p＜0.05）。在MM的分期分组中，随着MM病理分期的增高P27的表达及强度降低（p＜0.05）。在MM的分型分组中，P27与疾病分型无明显趋势（p＞0.05）。在MM的预后分组中，治疗前，CR组和NR组P27的表达及强度无明显差异（p＞0.05）；治疗后，CR组P27的表达及强度明显高于NR组（p＜0.05）。5.相关性分析： CyclinD1或CyclinD2与P27蛋白在MM中的阳性表达呈明显的负相关。CyclinD3与P27蛋白在MM中的阳性表达呈正相关关系。而CyclinD1、CyclinD2及CyclinD3在MM中的阳性表达两两呈负相关关系。结论：1. CyclinD1和CyclinD2在人骨髓瘤细胞中呈二选一的方式过度表达，其中一个蛋白强表达，另一个蛋白必定弱表达，两者呈负相关。在强表达情况下，CyclinD1或CyclinD2的表达随着MM恶性程度的增加而加强，它们作为MM的调控因子，均能客观地反映MM的进展及恶性程度。2. CyclinD3在骨髓瘤细胞中仅有少量表达，均为低强度，CyclinD3与MM的发生发展及恶性程度不存在明显的关系。3. P27蛋白在对照组中呈现高表达，而在MM组呈低表达，并随MM恶性程度的增加而降低，同时它的核表达均存在于对照组和CR组，P27有抑制骨髓瘤细胞生长作用，其表达部位的不同可作为判断疾病预后的一个指标。4.在MM的发病过程中，P27蛋白与CyclinD1及CyclinD2呈负相关，与CyclinD3呈正相关。而D型细胞周期蛋白的三个亚型两两呈负相关。