禹州漏芦提取物诱导K562细胞凋亡的研究

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目的:研究禹州漏芦提取物对人白血病K562细胞株抑制增殖与诱导凋亡的作用及其机制,探讨其与药物浓度的依赖性,从而为白血病的治疗寻找一种有效的中草药辅助制剂。  方法:1.以体外培养的人白血病K562细胞株为研究对象,应用MTT法,检测禹  州漏芦提取物对人白血病K562细胞株增殖的影响。  2.应用流式细胞仪,Annexin V和PI双染色,检测禹州漏芦提取物处理后细胞凋亡率。  3.蛋白免疫印迹(western-blot)检测禹州漏芦提取物处理后有关凋亡信号转导通路蛋白Bcl-2蛋白,Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白和PARP蛋白的表达。  结果:1.采用噻唑蓝(MTT)比色法检测结果显示,低剂量禹州漏芦提取物处理K562细胞24h,明显抑制K562细胞的增殖,与空白对照组相比,差别有统计学意义(P<0.01),其半数抑制浓度(IC50)分别为为4.995μg/ml。  2. Annexin V-PI双标记法流式细胞仪分析结果显示,不同浓度禹州漏芦提取物(5μg/mL,10μg/mL)作用K562细胞24h,诱导凋亡百分率分别为17.9%和67.54%,均表明凋亡细胞随药物浓度增加而增加。  3. Western blot结果显示Bax、cleaved PARP、cleaved caspase-3的含量随药物浓度上升呈上升趋势,Bcl-2的含量随药物浓度上升呈下降趋势。  结论:1.禹州漏芦提取物可直接抑制K562细胞的生长,并呈浓度依赖性。  2.不同浓度禹州漏芦提取物可明显地诱导K562细胞凋亡,且呈浓度依赖性。  3.线粒体凋亡途径在此过程中发挥着重要作用。
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