山东省辣椒病毒病病原分子鉴定及辣椒脉黄化病毒全基因组序列分析

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辣椒是山东省主要种植蔬菜之一。近年来,随着辣椒种植面积的增加,辣椒病毒病的危害日益严重,多呈现复合性侵染,严重影响辣椒的生产,已成为制约山东省辣椒产量和品质的主要因素。本研究以分子生物学技术为基础,对山东省10个辣椒种植区域进行15种病毒病病原的检测与鉴定,基本摸清山东省各辣椒产区病毒病发生情况以及主次关系,以及病毒复合侵染情况,同时对辣椒脉黄化病毒(Pepper vein yellows virus,PeVYV)山东分离物进行全基因组序列的克隆与分析,并结合不同地区的PeVYV分离物,对PeVYV进行系统发育分析。主要结论如下:1.利用15种病毒特异性引物检测253份辣椒样品,检测到14种病毒病原,病原种类有:PMMo V、CMV、TMGMV、BBWV、BWYV、TMV、ToMV、TYLCV、PVY、MABYV、CABYV、PeVYV、AMV和ChiVMV,CaCV未检测到。国内首次报道的辣椒病毒病原为BWYV、MABYV、CABYV和PeVYV。2.253份样品病毒检出率达96.0%,在所检出的辣椒病毒病病原中,PMMo V与CMV的检出率最高,分别为61.6%、60.0%,是危害山东省辣椒的重要病毒病原;TMGMV、BBWV、BWYV和TMV的侵染辣椒的现象非常普遍,检出率为42.3%、34.3%、24.9%和24.5%;其中BWYV是国内首次报道侵染辣椒的新病毒,TMGMV也成为侵染山东辣椒的主要病毒病原。ToMV、TYLCV、PVY、MABYV、CABYV、PeVYV和AMV的侵染现象较少,检出率分别为10.6%、7.5%、6.7%、3.5%、2.3%、1.9%和0.3%。3.在243份阳性样品中,仅检测到34份样品为单一病毒的侵染,其余209份样品为2种及以上病毒的复合侵染,复合侵染率为86.0%。其中以3种病毒复合侵染辣椒样品所占比例最高,为30.4%,2种病毒及4种病毒的复合侵染辣椒样品次之,侵染率分别为27.9%,27.5%。4.通过重叠PCR的方法测定了PeVYV山东分离物全基因组,序列分析表明PeVYV山东分离物的核苷酸序列与GenBank上PeVYV全基因组核苷酸序列的一致率在90.0%以上。
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