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目的研究熊果酸（ursolic acid，UA）对顺铂（cisplatin，CDDP）所致小鼠耳毒性的防护作用及其机制，为临床防治CDDP所致的耳毒性提供新思路。方法1.120只健康BALB／c小鼠随机分成对照组、UA组、CDDP组和CDDP＋UA组，每组30只。各组小鼠均连续腹腔注射5天，每天1次。应用免疫组织化学染色和免疫荧光染色、显微图像分析以及蛋白质印迹技术，观察小鼠耳蜗中瞬时感受器电位香草酸受体1（transient receptor potential vanilloid receptor1，TRPV1）、钙蛋白酶（calpain）、4-羟基壬烯醛（4-hydroxynonenal，4-HNE）以及caspase-3的表达；同时结合听脑干反应（auditory brainstem response，ABR）测试，观察用药前后实验动物听阈的改变。2.选用人卵巢癌细胞株SKOV3进行体外细胞培养，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法用于检测CDDP单独或联合应用UA对SKOV3细胞生长的抑制效应，观察UA对CDDP抗肿瘤作用的影响。结果1.连续用药5天后，在各刺激频率下，CDDP组小鼠ABR阈移明显增大，并且与对照组比较有显著性差异（P＜0.01）；CDDP＋UA组小鼠ABR阈移虽然在用药后也有增大，但较CDDP组明显减小（P＜0.01）。UA组与对照组小鼠ABR阈移无明显差异。2.免疫组织化学染色及显微图像分析结果显示，对照组小鼠的耳蜗外毛细胞（outer hair cell，OHC）、螺旋神经节（spiral ganglion，SG）以及血管纹（striavascularis，SV）中TRPV1、calpain1和calpain2的表达较弱，而CDDP组的表达较对照组明显增强（P＜0.01）；CDDP＋UA组TRPV1、calpain1和calpain2的表达则较CDDP组明显减弱（P＜0.05，P＜0.01）。UA组与对照组TRPV1、calpain1和calpain2的表达无明显性差别。3.免疫荧光染色及显微图像分析结果显示，对照组小鼠耳蜗OHC、SG以及SV中4-HNE的表达较弱；而CDDP组4-HNE的表达较对照组明显增强（P＜0.05）；CDDP＋UA组的表达则较CDDP组明显减弱（P＜0.05，P＜0.01）；UA组4-HNE的表达与对照组基本相同。4.蛋白质印迹检测及半定量分析结果显示，对照组和UA组小鼠耳蜗TRPV1、calpain1、calpain2、caspase-3和4-HNE的蛋白表达水平较低，而CDDP组小鼠耳蜗上述蛋白表达水平显著高于对照组（P＜0.01）；CDDP＋UA组小鼠耳蜗上述蛋白表达水平明显低于CDDP组（P＜0.05，P＜0.01）。5. MTT检测结果显示，CDDP对体外培养的SKOV3细胞生长具有抑制作用（P＜0.01）；CDDP与UA联合应用时，SKOV3细胞生长抑制率较单用CDDP明显提高（P＜0.01），并且随着UA浓度的逐渐增大，SKOV3细胞生长抑制率也逐渐提高（P＜0.01）。结论TRPV1/calpain信号通路和脂质过氧化介导了CDDP对小鼠的耳毒性损伤，UA可通过抑制CDDP所致TRPV1和calpain的高表达、防止脂质过氧化，从而有效拮抗CDDP的耳毒性，并且UA能增强CDDP的抗肿瘤作用，提示UA有望成为临床防护CDDP耳毒性的新型药物。