糖萜素对高脂血症金黄地鼠防治效果的初步研究

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糖萜素(Saccharicterpenin,STP)是我国首项具有知识产权的新型饲料添加剂,其核心技术已经获得中国、美国、欧洲等18个国家的发明专利,其成果曾入选国家“十五”重大科技成就展。已有研究和应用表明,糖萜素具有增强动物免疫和改善肉质的功能。本次试验以金黄地鼠为研究对象,建立高脂血症(Hyperlipidaemia, HLP)金黄地鼠模型来探讨糖萜素对高脂血症的作用。研究主要分为两部分:试验一糖萜素对高脂血症金黄地鼠的治疗作用;试验二糖萜素对高脂血症金黄地鼠的预防作用及机理研究。  试验一:将15只金黄地鼠随机分成2组,即正常对照组和高脂组。正常对照组5只,其余均为高脂组。正常对照组饲喂正常饲料,高脂组给予高脂饲料喂养。在喂养3周后,检测金黄地鼠血清总胆固醇(Total Cholesterol,TC),甘油三酯(Triglyceride,TG),低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的水平以评价高脂血症金黄地鼠模型的建立是否成功。经鉴定,高脂血症金黄地鼠模型成功建立后,将高脂组金黄地鼠按照血脂水平蛇形分布,分为高脂模型组和糖萜素治疗组,治疗组开始以体重500 mg/kg糖萜素进行2周的灌胃治疗,其余两组给予无菌水灌胃。  1.在金黄地鼠饲养第21天,检测血脂相关指标,高脂组金黄地鼠血清中TC、TG和LDL-C分别是正常对照组的2.5倍(P<0.05),3.73倍(P<0.05)和6.01倍(P<0.05),表明所建立的为混合型高脂血症金黄地鼠模型。  2.高脂模型组金黄地鼠血清TC水平分别比正常对照组和治疗组高444.63%和44.29%(P<0.05);高脂模型组血清TG分别比正常对照组和治疗组高205.23%和44.54%(P<0.05);高脂模型组LDL-C分别比正常对照组和治疗组高351.35%和47.77%(P<0.05);高脂模型组HDL-C比正常对照组高23.97%(P<0.05),治疗组比高脂模型组高9.67%(P>0.05);  3.正常对照组肝小叶形态正常,肝细胞大小均匀一致,形态规则;高脂模型组肝小叶轮廓不清晰,肝细胞肿胀,部分肝细胞出现空泡变性,可见炎症细胞浸润;糖萜素治疗组肝小叶轮廓不很清晰,部分肝细胞出现小空泡变性,有部分细胞内细胞核消失。  研究结果表明:给予500 mg/kg的糖萜素进行灌胃治疗,在一定程度上改善高脂血症金黄地鼠的血脂水平和肝脏的脂肪病变。  试验二:将15只8周龄的雄性金黄地鼠随机分为3组,每组各五只。除正常组饲喂正常饲料外,其余各组均给予高脂饲料进行喂养。从高脂饲料喂养的第一天开始,预防组开始按体重100 mg/kg的糖萜素对金黄地鼠进行灌胃。在喂养3周后,检测金黄地鼠血清TC、TG和LDL-C,高密度脂蛋白胆固醇(High densitylipoprotein cholesterol,HDL-C)的水平和动脉粥样硬化指数(AtherosclerosisIndex,AI)探索糖萜素预防金黄地鼠高脂血症效果。在饲喂5周后,同样采血,检测血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量及肝脏中TC、TG、脂蛋白酯酶(Lipoprotein lipase, LPL)、NF-κ B(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer ofactivated B cells)的水平和制作肝脏病理切片评价糖萜素预防高脂血症金黄地鼠的作用及其机理。  1.高脂模型组比正常对照组金黄地鼠在35天时平均日增重增加21.84%(P>0.05),预防组比正常对照组降低14.94%(P>0.05);预防组比高脂模型组日增重降低43.24%(P<0.05)。高脂模型组金黄地鼠的内脏脂肪比正常对照组增加21.01%(P<0.05),预防组比高脂模型组降低35.38%(P<0.05)。  2.在试验21d时,高脂模型组金黄地鼠血清中TC分别比正常对照组和预防组高308.81%和25.35%(P<0.05);高脂模型组血清中TG比正常对照组高175.66%(P<0.05),比预防组高43.95%(P>0.05);高脂模型组HDL-C分别比正常对照组和预防组高23.97%和9.67%(P>0.05);高脂模型组LDL-C比正常对照组高445.18%(P<0.05),比预防组高11.91%(P>0.05)。在试验结束时(灌胃35d),高脂模型组金黄地鼠血清TC的水平分别比正常对照组和预防组高463.79%和33.82%(P<0.05);高脂模型组TG分别比正常对照组和预防组高242.66%和38.98%(P<0.05);高脂模型组LDL-C分别比正常对照组和预防组的高407.76%和34.43%(P<0.05);高脂模型组HDL-C比正常对照组高100.77%(P<0.05),比预防组低4.40%(P>0.05);高脂模型组LDL-C/HDL-C值分别比正常对照组和预防组高152.80%和31.01%(P<0.05);高脂模型组AI分别比正常对照组和预防组高480.33%和38.70%(P<0.05)。结果表明,按体重100 mg/kg的糖萜素灌胃金黄地鼠21d时,糖萜素有一定预防金黄地鼠高脂血症效果,灌胃35d时,糖萜素明显预防金黄地鼠高脂血症效果。  3.高脂模型组金黄地鼠肝脏中TC含量比正常对照组高25.17%(P<0.05),预防组比高脂模型组高6.42%(P>0.05);高脂模型组肝脏中TG的含量比正常对照组高90.91%(P<0.05),比预防组高16.67%(P>0.05);高脂模型组肝脏中LPL的活性比正常对照组低18.35%(P>0.05),比预防组低36.73%(P<0.05);高脂模型组金黄地鼠肝脏中的NF-κ B蛋白表达条带颜色明显比正常对照组和预防组深;蛋白条带经灰度值扫描,统计分析后,与正常组和预防组相比,高脂模型组NF-κ B蛋白表达量均显著增加(P<0.05)。  4.正常对照组肝小叶形态正常,肝细胞大小均匀一致、形态规则;高脂模型组肝小叶轮廓不清晰,肝细胞肿胀,部分肝细胞出现空泡变性,;预防组肝脏中有部分肝细胞出现小空泡变性,炎症细胞浸润和坏死细胞比高脂模型组减少;  研究结果表明:给予金黄地鼠100 mg/kg的糖萜素灌胃,明显减少高脂饲料饲养诱发的高脂血症金黄地鼠体重、脂肪沉和血脂水平以及减少肝脏脂肪病变和炎症反应,其机制可能与糖萜素抑制NF-κ B的表达有关。
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