聚电解质/聚氨酯/脱细胞支架血管补片的研究

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组织工程血管是指利用组织工程学方法构建的具有优异生物相容性和生物力学特性的类似活体血管的替代物,其研究范围涉及血管支架材料、种子细胞和组织工程血管的构建。目前,组织血管工程研究领域的重中之重在于血管支架方面的研究。脱细胞支架作为一种脱细胞血管基质材料可有效避免抗原反应,且无其他材料的诸多缺陷,已成为组织血管支架领域新的研究热点。聚氨酯具有优异的机械性能和良好的生物相容性,被广泛应用于生物医用材料领域。壳聚糖是一种天然阳离子弱碱性多糖,具有优异的生物相容性以及良好的可降解性,但壳聚糖作为血液接触类材料使用时会引起凝血反应,因此诸多研究都致力于对壳聚糖进行改性,以提高它的血液相容性。肝素是一种负电荷天然阴离子多糖,人们常用肝素来改性壳聚糖的血液相容性,肝素和壳聚糖通过静电作用形成聚电解质复合物,是其中最为简便有效的改性之一。本实验依次用涂覆和层层自组装技术对脱细胞支架进行改性,并研究改性后产品的特性。主要研究内容如下:利用十二烷基硫酸钠和Triton X-100的协同作用来进行血管的脱细胞处理,制备脱细胞支架并对制得的脱细胞支架进行各项表征,HE染色和免疫组化实验结果表明血管壁结构细胞和内皮细胞已被成功脱除;通过涂覆的方法将聚氨酯涂覆到脱细胞支架上,扫描电镜、X-射线光电子能谱测试结果证实,聚氨酯成功的修饰到脱细胞支架表面;利用层层自组装技术将肝素和壳聚糖以分子间静电力组成的聚电解质修饰到聚氨酯/脱细胞支架上。扫描电镜、X-射线光电子能谱测试、材料表面氨基含量测定等结果证明,肝素-壳聚糖聚电解质已经被成功修饰到聚氨酯/脱细胞支架表面。通过对制备的不同层数的聚电解质/聚氨酯/脱细胞支架血管补片进行力学性能、血液相容性和细胞相容性等测试,实验结果均表明制得的血管补片材料在不影响机械性能的前提下,血液相容性和细胞毒性都得到了很大改善;本文还将聚电解质/聚氨酯/脱细胞支架血管补片植入实验小乳猪体内,进行动物实验,B超、多普勒实验和CT结果显示,在不使用抗凝血药剂的情况下,血液在血管补片植入部位可以顺利流动。说明本实验中制备的聚电解质/聚氨酯/脱细胞支架血管补片可以起到正常血管替代物的作用。
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