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精氨酸双糖苷(arginylfructosyl glucose，AFG)，是1996年郑毅男教授从红参中首次发现并分离纯化得一种结构全新的氨基酸衍生物，并指出其为人参高温炮制过程中发生美拉德反应(Maillard Reaction)形成的美拉德产物(Maillard Reaction Products, MRPs)之一。研究显示，AFG具有抗糖尿病、抗氧化、抗炎和抗衰老等多种药理活性。韩国已经将AFG作为评价韩国红参及其制品的指标性成分[1]。由于其特殊的化学结构，在我国对于AFG的研究仍处于起步阶段，并未有人进行过系统的检测与成分变化探究。
顺铂(Cisplatin，CDDP)作为临床上最常用的化疗药物之一，广泛应用于多种肿瘤疾病的治疗，但其严重的副作用如肾损伤(acute kidney injury，AKI)使其使用受限。AFG作为非皂苷类代表性物质，在红参中含量约为3%~5%且含有丰富的药理活性。近年，虽然据报道人参的主要成分—人参皂苷对CDDP诱导的AKI具有明显保护作用，但非皂苷类成分对CDDP的有益作用的研究却尚未见报道。因此，探究以AFG为代表的非皂苷类成分是否同样具有肾保护作用具有重要的理论意义，能够为红参的应用提供一定的理论参考和借鉴。
1．本研究建立阴离子交换色谱-脉冲安培法(HPAEC-PAD)检测AFG含量的方法，同时对于定量限，检出限，线性范围，加样回收率等进行方法学验证。并运用该方法对于吉林省不同产地、不同年限人参、红参及黑参中AFG进行定量分析。随后对于AFG含量的动态变化进行分析。采用美国Thermo-FisherScientific公司ICS5000+型离子色谱仪，CarboPacPA10色谱柱，脉冲安培检测器进行检测，在H2O和200mmol/LNaOH淋洗，流速为0.8mL/min条件下，成功测定了人参及其加工产品中AFG。经实验优化，单次运行20min后可以达到较好的分离效果；线性相关系数(R2)为0.9994，检出限(RSN=3)和定量限(RSN=10)分别为0.02μg·mL-1和0.09μg·mL-1。本方法可以成功应用于人参及其制品中AFG的定量分析研究。通过人参及红参、黑参样品中AFG含量分析发现，随年限增加，AFG含量有所提升，约占总成分的0.4%~1.891%；红参中，随着年限的增加，AFG含量上升尤为显著，占总成分的0.78%~5.4%；九蒸九制的黑参AFG含量极少，而发酵黑参中未检出。随后，对于这一现象进行探究。选取4年生鲜人参，通过改变烘干时间以及烘干温度对于其生成影响进行原因探究。发现烘干温度对于AFG形成影响相对较大。结论：本实验建立的HPAEC-PAD法方法稳定、准确、可靠，为今后利用该方法检测美拉德产物或阿马多利化合物等成分提
供一定的理论支撑。不同条件对于AFG等美拉德反应产物生成影响很大，若想获得含量较高的美拉德产物需要在相对高的烘干温度下进行。
2．本研究通过建立CDDP诱导的小鼠急性肾损伤动物模型，较为深入的探讨了AFG对其的保护作用及潜在分子机制。结果表明：AFG在40和80mg/kg剂量下，能够明显的降低了CDDP导致的血清中肌酐(CRE)和尿素氮(BUN)水平。此外，连续10天给予AFG明显降低CDDP引起的氧化应激反应，以及抑制肾组织中MDA的产生，CYP2E1和4-HNE的过度表达；同时升高肾组织中谷胱甘肽(GSH)，过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)含量，表明：AFG对CDDP诱导的氧化应激的改善作用。此外，实验通过Westernblot和IHC进一步揭示AFG明显抑制CDDP诱导的肾组织中iNOS和COX-2的过表达。同时，AFG抑制了相关促炎细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的mRNA水平的表达。TUNEL染色及凋亡相关蛋白分析进一步佐证了AFG具有明显的抗凋亡作用。此外，研究发现：AFG预给药能够显著抑制NF-κB信号通路的表达并激活PI3K/Akt信号通路。总之，本研究清晰表明，AFG可以通过减轻NF-κB信号的级联反应并且调节PI3K/Akt信号通路来减轻CDDP诱导的炎症、氧化应激和细胞凋亡。
顺铂(Cisplatin，CDDP)作为临床上最常用的化疗药物之一，广泛应用于多种肿瘤疾病的治疗，但其严重的副作用如肾损伤(acute kidney injury，AKI)使其使用受限。AFG作为非皂苷类代表性物质，在红参中含量约为3%~5%且含有丰富的药理活性。近年，虽然据报道人参的主要成分—人参皂苷对CDDP诱导的AKI具有明显保护作用，但非皂苷类成分对CDDP的有益作用的研究却尚未见报道。因此，探究以AFG为代表的非皂苷类成分是否同样具有肾保护作用具有重要的理论意义，能够为红参的应用提供一定的理论参考和借鉴。
1．本研究建立阴离子交换色谱-脉冲安培法(HPAEC-PAD)检测AFG含量的方法，同时对于定量限，检出限，线性范围，加样回收率等进行方法学验证。并运用该方法对于吉林省不同产地、不同年限人参、红参及黑参中AFG进行定量分析。随后对于AFG含量的动态变化进行分析。采用美国Thermo-FisherScientific公司ICS5000+型离子色谱仪，CarboPacPA10色谱柱，脉冲安培检测器进行检测，在H2O和200mmol/LNaOH淋洗，流速为0.8mL/min条件下，成功测定了人参及其加工产品中AFG。经实验优化，单次运行20min后可以达到较好的分离效果；线性相关系数(R2)为0.9994，检出限(RSN=3)和定量限(RSN=10)分别为0.02μg·mL-1和0.09μg·mL-1。本方法可以成功应用于人参及其制品中AFG的定量分析研究。通过人参及红参、黑参样品中AFG含量分析发现，随年限增加，AFG含量有所提升，约占总成分的0.4%~1.891%；红参中，随着年限的增加，AFG含量上升尤为显著，占总成分的0.78%~5.4%；九蒸九制的黑参AFG含量极少，而发酵黑参中未检出。随后，对于这一现象进行探究。选取4年生鲜人参，通过改变烘干时间以及烘干温度对于其生成影响进行原因探究。发现烘干温度对于AFG形成影响相对较大。结论：本实验建立的HPAEC-PAD法方法稳定、准确、可靠，为今后利用该方法检测美拉德产物或阿马多利化合物等成分提
供一定的理论支撑。不同条件对于AFG等美拉德反应产物生成影响很大，若想获得含量较高的美拉德产物需要在相对高的烘干温度下进行。
2．本研究通过建立CDDP诱导的小鼠急性肾损伤动物模型，较为深入的探讨了AFG对其的保护作用及潜在分子机制。结果表明：AFG在40和80mg/kg剂量下，能够明显的降低了CDDP导致的血清中肌酐(CRE)和尿素氮(BUN)水平。此外，连续10天给予AFG明显降低CDDP引起的氧化应激反应，以及抑制肾组织中MDA的产生，CYP2E1和4-HNE的过度表达；同时升高肾组织中谷胱甘肽(GSH)，过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)含量，表明：AFG对CDDP诱导的氧化应激的改善作用。此外，实验通过Westernblot和IHC进一步揭示AFG明显抑制CDDP诱导的肾组织中iNOS和COX-2的过表达。同时，AFG抑制了相关促炎细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的mRNA水平的表达。TUNEL染色及凋亡相关蛋白分析进一步佐证了AFG具有明显的抗凋亡作用。此外，研究发现：AFG预给药能够显著抑制NF-κB信号通路的表达并激活PI3K/Akt信号通路。总之，本研究清晰表明，AFG可以通过减轻NF-κB信号的级联反应并且调节PI3K/Akt信号通路来减轻CDDP诱导的炎症、氧化应激和细胞凋亡。