【摘 要】
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目的:探索鼠脂肪干细胞通过TGF-β信号通路对鼠乳腺癌4T1细胞增殖及侵袭转移的影响,为自体脂肪填充术的临床应用提供新的思路。方法:选取BALB/c小鼠,利用鼠腹部脂肪组织,通过分离培养获取鼠脂肪干细胞;实验用肿瘤细胞为小鼠乳腺癌4T1细胞。将实验分为三组,对照组:单独培养的4T1细胞;实验组1:与ADSCs共培养的4T1细胞;实验组2:与ADSCs共培养并添加TGF-β抗体的4T1细胞。1、对小
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目的:探索鼠脂肪干细胞通过TGF-β信号通路对鼠乳腺癌4T1细胞增殖及侵袭转移的影响,为自体脂肪填充术的临床应用提供新的思路。方法:选取BALB/c小鼠,利用鼠腹部脂肪组织,通过分离培养获取鼠脂肪干细胞;实验用肿瘤细胞为小鼠乳腺癌4T1细胞。将实验分为三组,对照组:单独培养的4T1细胞;实验组1:与ADSCs共培养的4T1细胞;实验组2:与ADSCs共培养并添加TGF-β抗体的4T1细胞。1、对小鼠脂肪组织分离培养获取的ADSCs,进行流式细胞学的检测和诱导分化能力的验证;2、通过CCK法、RT-PCR,检测肿瘤细胞增殖情况;3、通过细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验检测肿瘤细胞侵袭转移情况。结果:1、分离培养的ADSCs呈梭形纤维样贴壁生长,诱导培养4周后显示已经分化为脂肪、成骨细胞;2、流式细胞仪检测显示CD29、CD44的表达为阳性,而CD45、CD34的表达为阴性;3、CCK法显示实验组1较对照组、实验组2,在48小时有明显的4T1细胞增殖(P<0.05);4、RT-PCR检测显示实验组1相较于对照组,PCNA的表达显著增加(p<0.01);实验组1相较于实验组2,PCNA的表达有统计学意义(p<0.05);实验组1较对照组和实验组2,Caspase-3的表达明显减少(p<0.05);5、细胞划痕实验显示实验组1与实验组2、对照组相比,细胞划痕区域愈合速度快;6、Transwell细胞迁移实验表明实验组1较对照组、实验组2发生了明显的迁移侵袭(P<0.05)。结论:1、从小鼠腹部脂肪组织能成功获取ADSCs;2、鼠ADSCs能促进鼠乳腺癌4T1细胞增殖和侵袭转移;3、鼠脂肪干细胞可能通过TGF-β信号通路影响鼠乳腺癌4T1细胞的增殖及侵袭转移。
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