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背景和目的：肿瘤因其严重危害性而备受关注，人们在不同领域、从不同层次研究肿瘤，试图了解肿瘤发生的确切机理，并寻找更有效的治疗方法。近年来不少研究表明，蜕膜细胞具有抑制滋养细胞增殖、侵袭，并限制某些癌细胞生长，甚至诱导其凋亡的重要特性。其机制可能与它合成分泌的细胞因子、生长因子等有关。本课题试图阐述的问题是：（1）了解晚孕蜕膜组织培养上清对不同组织来源的肿瘤细胞和正常细胞的形态、生长、侵袭等生物学行为的影响；（2）初步探讨引起这些变化的生物学机制。方法：收集健康的足月妊娠剖宫产妇女底蜕膜行组织原代培养，先用含10％小牛血清的RPMI 1640培养液培养24h，再换成无血清RPMI 1640继续培养48h，收集培养上清液，用无血清RPMI 1640稀释成不同浓度作为实验组处理因素；无血清RPMI 1640作为对照组的处理因素。分别培养正常细胞株，人气管上皮细胞9HTE和不同组织来源的肿瘤细胞，包括人卵巢癌细胞SKOV3、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人宫颈癌细胞HeLa、人绒癌细胞JAR、人膀胱癌细胞T24，人肝癌细胞SMMC-7721、人肺癌细胞A549、人慢性粒细胞白血病细胞K562。光镜（倒置显微镜）、H.E染色、Wright染色和透射电镜等方法观察细胞形态学变化。四唑盐（MTT）比色法、流式细 <WP=7>胞仪、PCNAmRNA原位杂交和cyclinD1免疫细胞化学方法，进一步了解细胞生长情况。通过细胞迁移能力实验（transwell inserts），以及半定量-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测MMP-2，MMP-9和TIMP-1mRNA表达检测条件培养液对肿瘤细胞侵袭的影响。结果：光镜和染色结果显示，经DCM处理后，9HTE、HeLa、T24、SMMC-7721、A549细胞形态基本没有发生改变；SKOV3和MDA-MB-231细胞形态也没有明显改变，但细胞密度增大，处于分裂增生的细胞数量较对照组多；部分JAR细胞染色体聚集，核固缩，细胞变圆，脱落； K562细胞有的发生皱缩，体积变小，核固缩，有的出现胞膜破裂，胞浆溶解，核碎裂。电镜结果：9HTE、HeLa、T24、SMMC-7721和A549细胞处理组和对照组超微结构没有明显改变。SKOV3、MDA-MB-231细胞结构正常，处理组细胞核分裂相增多，增殖明显。JAR细胞处理组，有的细胞胞浆可见脂滴和髓样结构；少量细胞可见线粒体，内质网等细胞器肿胀；有的细胞染色质在核内聚集成巨大的团块，核分裂相极少，有核碎裂；大量凋亡小体形成。K562细胞处理组出现胞质固缩，染色质浓缩并附于核膜，核碎裂和凋亡小体形成等。用0%、15%、30%、50%等不同浓度的DCM培养细胞，根据MTT结果绘制生长曲线提示，随着浓度升高，处理组中SKOV3和MDA-MB-231细胞呈正相关生长(P<0.05)；而K562细胞呈负相关生长(P<0.05)；且处理后48h效果最明显(P<0.05)；9HTE、HeLa、T24、SMMC-7721和A549细胞的生长与对照组无显著性差异(P>0.05)。细胞周期结果，SKOV3和MDA-MB-231细胞处理组G0、<WP=8>G1期细胞明显少于对照组，而S、M期细胞数明显增加 (P<0.05)；K562细胞处理组停滞于G0、G1期，S、M期细胞明显减少(P<0.05)；9HTE、HeLa、T24、SMMC-7721和A549细胞各自的处理组与对照组细胞周期变化无统计学意义（P>0.05）。在检测PCNAmRNA原位杂交和cyclinD1免疫细胞化学染色在SKOV3和MDA-MB-231细胞表达的结果显示，处理组PCNAmRNA和cyclinD1分别在这两种细胞胞浆、胞核内呈阳性表达，且高于对照组(P<0.05)。Transwell小室结果，处理组中，K562细胞透过酯膜的细胞减少（p<0.05），MDA-MB-231细胞透过数增加（p<0.05），9HTE、SKOV3、HeLa、T24、SMMC-7721和A549细胞穿过聚碳酸酯膜数较对照组无统计学差异（p>0.05）。RT-PCR结果显示，K562细胞处理组MMP-2，MMP-9mRNA表达减弱，而TIMP-1mRNA的表达增强（p<0.05）； JAR细胞处理组和对照组则没有显著性差异（P>0.05）。结论：人晚孕蜕膜组织条件培养液（DCM）能抑制白血病细胞K562和绒癌细胞JAR的体外生长，诱导部分细胞凋亡，它对K562细胞的生长抑制与使其细胞周期停滞于静止期（G0-G1期）有关。DCM还能激发SKOV3、MDA-MB-231细胞PCNAmRNA 和cyclinD1的表达，诱导这两种细胞进入S期（DNA合成期）和M期（有丝分裂期），促进二者的体外增殖。此外，DCM通过降低K562细胞体外迁移能力，下调MMP-2，MMP-9mRNA的表达，上调 TIMP-1mRNA的表达，削弱K562细胞的侵袭性，但对JAR细胞的侵袭性没有影响。DCM促进MDA-MB-231细胞侵袭，可能与其促进该细胞生长，细胞<WP=9>间压力增加有关。DCM对正常细胞株9HTE和其他组织来源的肿瘤细胞，如HeLa、T24、SMMC-7721和A549细胞形态、体外增殖和侵袭等生物学行为没有明显影响。