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本文针对制备一种丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂盒进行了研究。首先制备了包被酶标板，根据包被的流程，其中能够影响到包被效果的因素有：包被缓冲液的选择、包被抗体浓度的选择、包被条件的选择、洗涤缓冲液的选择等，最终经过试验验证，获得了最佳的包被条件来制备包被酶标板。 本研究主要内容包括：⑴将抗HCV-cAg抗体用50mmol/L、pH7.5的Tris-HC l包被缓冲液稀释到浓度为20mg/L制成包被液，加入酶标板孔中，4℃包被36h，选用PBST缓冲液，其中Tween-20的浓度为2％，洗涤过程中需要进行振荡操作，10s/次重复进行3次洗板。加入1%的BSA封闭液，4℃封闭过夜，最后在室温放置干燥。⑵制备了酶结合物，通过优化酶结合物制备的各个条件，确定了酶结合物制备的各种关键条件分别为：最佳的酶浓度为50g/L，酶标的环境为4℃混匀12h。⑶应用时，利用含BSA、庆大霉素、硫柳汞各1‰浓度的稀释液对酶标记抗体进行稀释，稀释成1/3000的浓度，稀释液为pH7.5浓度为100mmol/L的PBS缓冲液，即为所需的酶结合物。⑷经过对显色底物液A液和B液主体组分的研究，确定了最终的配方为：A液：将5gTMB粉溶于1L含10%的DMSO溶剂中，均匀混合后配成浓度适宜的溶液，然后再向溶液中缓慢加入10%体积的甘油，以上操作全部在避光条件下进行，最后将A液装入黑瓶，避光、4℃保存；B液：称取0.5g过氧化脲用pH5.50.2 mol/L磷酸氢二钠与0.1 moL/L柠檬酸缓冲液1L进行溶解。⑸配制后的显色液最佳的反应温度确定为30℃，分析样本的灵敏度为0.1μg/L，平台期为1-8min。⑹通过实验检测，自制试剂盒阳性符合率为96.7%，而阴性符合率为100%；重复性变异系数为6.32%；批次间变异系数为8.69%；与国际市场上同类试剂盒对比检测，相关系数为r=0.9977，检测结果一致。